酶聯(lián)免疫分析法標記抗體或抗原反應是最常見的標記方法，酶聯(lián)免疫分析法有哪些？不僅是我們常常考到的，還是工作中遇到的基本問題，醫(yī)學教育網(wǎng)整理了酶聯(lián)免疫分析法標記抗體或抗原反應，希望對大家有幫助。

酶聯(lián)免疫分析法：酶聯(lián)免疫分析法（enzyme immunoassay，EIA）是當前應用最廣泛的免疫檢測方法。本法將抗原抗體反應的特異性與酶對底物高效催化作用結(jié)合起來，根據(jù)酶作用底物后顯色，以顏色變化判斷試驗結(jié)果，可經(jīng)酶標測定儀作定量分析，敏感度可達ng水平。常用于標記的酶有辣根過氧化物酶（horseradish peroxidase）、堿性磷酶（alkaline phosphatase）等。它們與抗體結(jié)合不影響抗體活性。這些酶具有一定的穩(wěn)定性，制成酶標抗體可保存較長時間。目前常用的方法有酶標免疫組化法和酶聯(lián)免疫吸附法。前者測定細胞表面抗原或組織內(nèi)的抗原；后者主要測定可溶性抗原或抗體。本法既沒有放射性污染又不需昂貴的測試儀器，所以較放射免疫分析法更易推廣。

（1）酶聯(lián)免疫吸附試驗（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）：是與上述固相RIA相似的原理，將抗原或抗體吸附在固相載體表面。使抗原抗體反應在固相載體表面進行政區(qū)?？捎瞄g接法、雙抗體夾心法或競爭法測定抗原或抗體。

（2）夾心法（sandwich assay）：將已知的特異抗體包裝在固相載體（塑料板凹孔或紙片上），加入待檢標本，醫(yī)'學教育網(wǎng)搜集整理標本中的抗原即可與載體上的抗原結(jié)合，洗去未結(jié)合的材料后加入該抗原的酶標記抗體，洗去未結(jié)合的酶標抗體，加底物顯色，用酶免疫檢測儀測量顏色的光密度，可定量測定抗原。

間接法（indirecr ELISA）常用于檢查特異抗體。先將已知特異抗原包被固相載體，加入待檢標本（可能含有相應抗體），再加入酶標抗Ig的抗全（即第二抗體），經(jīng)加底物顯色后，根據(jù)顏色的光密度計算出標本中抗體的含量。

（3）BAS-ELISA：近年來對酶免設分析法的改進是使用生物素-親合素-過氧化物酶復合物作為指示劑，組成一新的生物放大系統(tǒng)進一步提高檢測的敏感度?？捎脕頇z測多種抗原抗體系統(tǒng)如細菌、病毒、腫瘤細胞表面抗原等。醫(yī)'學教育網(wǎng)搜集整理一個親合素（avidin）分子可以結(jié)合4個生物素分子（biotin）。結(jié)合非常穩(wěn)定。親合素和生物素都可與抗全、酶、熒光素等分子結(jié)合，而不影響后者的生物活性。一個抗體分子可偶聯(lián)90個生物素分子，通過生物素又可連接多個親合素。因此大提高檢測的敏感度。目前應用生物-酶標親合素系統(tǒng)（biotinavidin system- ELISA，BAS-ELISA），它是通過生物素標記抗體連接免疫反應系統(tǒng)，同時借助生物素化酶或酶標親合素引入酶與底物反應系統(tǒng)。