醫(yī)學教育網臨床醫(yī)學檢驗技士《答疑周刊》2015年8期：

【問題】細胞內膽固醇少了LDL受體會增加，為什么是負反饋調節(jié)？？

LDL或其他含ApoB100的脂蛋白如VLDL與LDL受體結合后，內吞入細胞，經溶酶體酶作用，膽固醇酯水解成游離膽固醇。若胞內膽固醇濃度升高，可通過：

①抑制HMGCoA還原酶，減少自身的膽固醇合成；

②抑制LDL-R基因的表達，減少LDL-R的合成，從而減少LDL的攝取；

③激活內質網脂?；鵆oA膽固醇?；D移酶（ACAT），使游離膽固醇在胞質內酯化成膽固醇酯貯存，從而控制細胞內膽固醇含量，使其處于正常動態(tài)平衡狀態(tài)。因此為負反饋調節(jié)。

2免疫印跡法和斑點酶免疫吸附試驗區(qū)別

免疫印跡法(Westernblotting)是一種將高分辨率凝膠電泳和免疫化學分析技術相結合的雜交技術。免疫印跡法具有分析容量大、敏感度高、特異性強等優(yōu)點，是檢測蛋白質特性、表達與分布的一種最常用的方法，如組織抗原的定性定量檢測、多肽分子的質量測定及病毒的抗體或抗原檢測等。免疫印跡法(immunobiottingtest,IBT)亦稱酶聯(lián)免疫電轉移印斑法(enzymelinkedimmunoelectrotransferblot,EITB),因與Southern早先建立的檢測核酸的印跡方法Southernblot相類似，亦被稱為Western-blot.

酶聯(lián)免疫吸附試驗(以下簡稱ELISA)：是酶免疫測定技術中應用最廣的技術。其基本方法是將已知的抗原或抗體吸附在固相載體(聚苯乙烯微量反應板)表面，使酶標記的抗原抗體反應在固相表面進行，用洗滌法將液相中的游離成分洗除。常用的ELISA法有雙抗體夾心法和間接法，前者用于檢測大分子抗原，后者用于測定特異抗體。

免疫印跡法和斑點酶免疫吸附試驗兩者的反應原理不同。免疫印跡法(Westernblotting)是一種將高分辨率凝膠電泳和免疫化學分析技術相結合的雜交技術；而酶聯(lián)免疫吸附試驗是雙抗體夾心法。因此兩者還是不同的。

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【問題】Coombs試驗的配血原理是什么？

凡Coombs試驗即抗人球蛋白試驗，是檢測血液中溫反應性抗體的一種方法，也是診斷自身免疫性溶血性貧血的重要指標。溫抗體中50%以上由IgG介導，其次為IgM，IgA和C3d等，因此本試驗應分選各種單克隆抗體同時測定。Coombs試驗分為直接試驗（直接反應）和間接試驗（間接反應）：直接試驗的目的是檢查紅細胞表面的不完全抗體；間接試驗的目的是檢查血清中存在游離的不完全抗體。

（1）直接coombs試驗用于檢測已粘附在紅細胞表面的不完全抗體。即將受檢紅細胞充分洗滌后，將抗球蛋白試劑加入已結合有抗體的受檢紅細胞懸液中，即可見細胞凝集?？捎貌Ｆㄗ龆ㄐ栽囼?，也可用試管法或微量法做半定量測定。用于檢測新生兒溶血癥、自身免疫性貧血和醫(yī)源性溶血性疾病等。

（2）間接coombs試驗用于檢測游離在血清中的不完全抗體。即將待測血清標本加入具有特異抗原的紅細胞懸液中，如果抗原抗體相應則發(fā)生結合，再加入抗球蛋白抗體，則出現(xiàn)紅細胞凝集。本法多用于檢測母體Rh（D）抗體以及因紅細胞不相容的輸血而產生的血型抗體。此外也可用專一特異性的抗球蛋白血清，如抗IgG、抗IgM、抗IgA、抗補體血清等，分析與紅細胞表面結合的不完全抗體的Ig亞類。

【問題】內源性溶血形成的復合物是FIXa還是FXIa？

凝血因子特性凝血因子目前包括14個，除FⅢ存在于全身組織中，其余均存在于血漿中。

根據(jù)理化性質分為四組。

（1）依賴維生素K凝血因子

包括FⅡ、FⅦ、FⅨ和FⅩ，其共同特點是在各自分子結構的氨基末端含有數(shù)量不等的γ-羧基谷氨酸殘基，在肝臟合成中必須依賴維生素K。依賴維生素K凝血因子（依K因子）通過γ-羧基谷氨酸與Ca2＋結合，再與磷脂結合，這是依K因子參與凝血反應的基礎。

（2）接觸凝血因子

包括經典FⅫ、FⅪ和激肽系統(tǒng)的激肽釋放酶原（PK）、高分子量激肽原（HMWK）。它們的共同特點是通過接觸反應啟動內源凝血途徑，并與激肽、纖溶和補體等系統(tǒng)相聯(lián)系。

（3）對凝血酶敏感的凝血因子：

包括FⅠ、FⅤ、FⅧ和FⅩⅢ，它們的共同特點是對凝血酶敏感。

（4）其他因子

包括FⅢ、FⅣ。正常情況下，F(xiàn)Ⅲ不存在于血液中。FⅣ即Ca2＋。凝血機制

凝血過程示意圖

內源凝血途徑

內源凝血途徑（intrinsicpathway）是指由FⅫ被激活到FⅨa-Ⅷa-Ca2＋-PF3復合物形成的過程。

外源凝血途徑

外源凝血途徑（extrinsicpathway）是指從TF釋放到TF-FⅦa-Ca2＋復合物形成的過程。

共同凝血途徑。

【臨床免疫學檢驗】

免疫學技術中的親和層析法，利用抗原抗體反應哪個特點來純化抗原或抗體

A．比例性

B．特異性

C．可逆性

D．親和力

E．疏水作用力

【正確答案】C

學員提問：答案是D吧。

解析：可逆性：可逆性指抗原抗體結合后形成的，復合物在一定條件下可發(fā)生解離，恢復抗原抗體的游離狀態(tài)?？乖贵w結合是分子表面的結合，猶如酶與底物的結合，是一種非共價鍵結合，結合雖穩(wěn)定但可逆；抗原抗體的結合是一種動態(tài)平衡過程，抗原抗體復合物的解離取決于抗體對相應抗原的親和力及反應條件（如離子強度、pH等）。免疫學技術中的親和層析法就是利用這個原理來純化抗原或抗體。因此答案為C。

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【臨床微生物學】

有關莢膜描述錯誤的是

A.具有免疫原性，可用于鑒別細菌

B.—般在機體內形成

C.具有抗吞噬作用

D.可增強細菌對熱的抵抗力

E.化學成分可以是多糖，也可以是多肽等

【正確答案】D

學員提問：細菌夾膜一般是在機體內形成嗎？不是某些細菌原來就存在的？

解答：細菌一般在機體內和營養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基中才能形成莢膜。有莢膜的細菌在固體培養(yǎng)基上形成光滑型（s型）或粘液型（m）菌落，失去莢膜后菌落變?yōu)榇植谛停╮）。莢膜并非細菌生存所必需，如莢膜丟失，細菌仍可存活。莢膜除對鑒別細菌有幫助外，還能保護細菌免遭吞噬細胞的吞噬和消化作用，因而與細菌的毒力有關。莢膜抗吞噬的機理還不十分清楚，可能由于莢膜粘液層比較光滑，不易被吞噬細胞捕捉之故。莢膜能貯留水分使細菌能抗干燥，并對其他因子（如溶菌酶、補體、抗體、抗菌藥物等）的侵害有一定抵抗力。

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【臨床血液學檢驗】

急性早幼粒細胞白血病細胞一般檢測不到下列哪種融合基因

A．PML-RARα

B．PLEF-RARα

C．Bcr/abl

D．NPM-RARα

E．以上融合基因都檢測不到

【正確答案】C

學員提問：請解釋一下。

解答:慢性髓細胞性白血病(chronicmyeloidleukemia，CML)細胞有t(9；22)(q34；q11)易位形成的費城染色體(Phchromosome)和BCR/ABL融合基因，它們在血液病研究中占有重要地位。在發(fā)現(xiàn)Ph染色體后的30多年里，臨床廣泛用細胞遺傳學方法檢測Ph染色體做CML的診斷和療效監(jiān)測。尤其近十余年，分子生物學方法檢測BCR/ABL融合基因的應用逐漸普及。因此急性早幼粒細胞一般檢測不到Bcr/abl。

因此答案為C。祝您順利通過考試！

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