1.空斑形成細胞（plaque formingcell，PFC）檢測

是體外檢測B細胞功能的一種方法。該法最早用于實驗動物的PFC測定。是以SRBC作為抗原免疫小鼠，從免疫小鼠脾臟分離淋巴細胞或直接用脾細胞，將其與高濃度SRBC混合于瓊脂中，經(jīng)37℃，5%CO2溫育后，在補體參與下抗體形成細胞周圍的SRBC溶解而形成溶血小區(qū)，即溶血空斑（plaque）。一個空斑代表一個抗體形成細胞，空斑的數(shù)量表示抗體形成細胞的多少。IgM參與本反應，固定補體能力強，可直接激活傳統(tǒng)途徑，導致SRBC溶解，稱直接法。若檢測其他類別免疫球蛋白的抗體形成細胞，需在試驗系統(tǒng)中加入相應的第二抗體才能使SRBC溶解形成空斑，稱間接空斑形成試驗。近年來，已應用SPA致敏的SRBC結(jié)合抗人球蛋白來檢測人的抗體形成細胞，此法稱SPA-SRBC溶血空斑試驗。在此檢測系統(tǒng)中加入抗人Ig，能與受檢細胞產(chǎn)生的Ig結(jié)合成復合物，并通過復合物中抗人IgFc段與致敏SRBC上的SPA結(jié)合，激活補體而使SRBC溶解?？瞻咝纬杉毎臋z測，有助于免疫應答動力學的研究和探討藥物對機體免疫狀態(tài)的影響。是目前研究B細胞抗體產(chǎn)生功能的重要手段。

2.定量溶血分光光度法（quantitative hemolysis spectrophotometry，QHS）

該法又稱B細胞介導的紅細胞定量溶血分光光度法，是根據(jù)溶血空斑試驗的原理衍化而來，可用以測定由B細胞產(chǎn)生和分泌的抗體裂解紅細胞所釋放的血紅蛋白（以吸光值表示），從而反映機體的體液免疫功能。試驗時，將免疫的脾細胞與SRBC及新鮮豚鼠血清等體積混合，于37℃水浴1小時，離心后測上清吸光值，其與產(chǎn)生抗體的量成正比。

3.ELISA-空斑試驗（ELISA-plaque assay）

又稱酶聯(lián)免疫斑點試驗（enzyme linked immunospot，ELISPOT）。該法與ELISA不同之處是醫(yī)學教育網(wǎng)搜|集整理，加入的待檢標本是細胞，而非可溶性物質(zhì)；所使用的底物可形成不溶性終產(chǎn)物。原理和步驟參見圖18.8.ELISPOT不僅可應用于B細胞分泌抗體功能的測定，也能檢測分泌細胞因子的T細胞和巨噬細胞?，F(xiàn)已有應用該技術于計數(shù)類風濕因子分泌細胞的報道，但尚未在臨床推廣。