方法名稱：

腺苷鈷胺片—腺苷鈷胺的測(cè)定—分光光度法

應(yīng)用范圍：

本方法采用分光光度法測(cè)定腺苷鈷胺片中腺苷鈷胺（C72H100CoN18O17P）的含量。

本方法適用于腺苷鈷胺片中腺苷鈷胺的測(cè)定。

方法原理：

取本品適量，除去包衣，研細(xì)，用水溶解并稀釋，搖勻，用微孔濾膜（0.45μm）濾過，取續(xù)濾液為供試品溶液，并用水配制對(duì)照品溶液，分別取對(duì)照品和供試品溶液適量，各精密加0.65%氰化鉀溶液，密塞，搖勻，在兩側(cè)距離200mm處，用100W白熾燈各一個(gè)同時(shí)照射1小時(shí)，照紫外-可見分光光度法，在368nm波長(zhǎng)處，分別測(cè)定吸收度，計(jì)算，并將計(jì)算結(jié)果與1.165相乘。

試劑：

1. 蒸餾水

2. 氰化鉀

儀器設(shè)備：

1. 可見分光光度計(jì)

2. 白熾燈

試樣制備：

1. 對(duì)照品溶液的制備

取維生素B12對(duì)照品約20mg，精密稱定，置500mL量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，即為對(duì)照品溶液。

2. 供試品溶液的制備

取本品10片，除去包衣，研細(xì)，用水分次轉(zhuǎn)移至50mL量瓶中，振搖，使腺苷鈷胺溶解并稀釋至刻度，搖勻，用微孔濾膜（0.45μm）濾過，取續(xù)濾液，即為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。

注：“水分測(cè)定”用烘干法。取供試品2-5g，平鋪于干燥至恒重的扁形稱量瓶中，厚度不超過5mm，疏松樣品不超過10mm，精密稱定，打開瓶蓋在100-105℃干燥5小時(shí)，將瓶蓋蓋好，移至干燥器中，冷卻30分鐘，精密稱定重量，再在上述溫度干燥1小時(shí)，冷卻，稱重，至連續(xù)兩次稱重的差異不超過5mg為止。根據(jù)減失的重量，計(jì)算供試品中含有水分的百分?jǐn)?shù)。

操作步驟：

供試品的測(cè)定

精密量取上述對(duì)照品和供試品溶液各10mL，分別置25mL具塞試管中，各精密加0.65%氰化鉀溶液15mL，密塞，搖勻，在兩側(cè)距離200mm處，用100W白熾燈各一個(gè)同時(shí)照射1小時(shí)，照紫外-可見分光光度法，在368nm波長(zhǎng)處，分別測(cè)定吸收度，計(jì)算，并將計(jì)算結(jié)果與1.165相乘。