照高效液相色譜法(中國(guó)藥典1995年版一部附錄 Ⅵ D)測(cè)定(應(yīng)避光操作)。 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為固定相;甲醇—水(75:25)為流動(dòng)相;檢測(cè)波長(zhǎng)為270nm;理論板數(shù)按丹參酮 ⅡA 峰計(jì)算,應(yīng)不低于2000。 對(duì)照品溶液的制備 精密稱取經(jīng)100℃干燥至恒重的丹參酮 ⅡA對(duì)照品10mg,置50ml棕色量瓶中,加甲醇溶解并稀釋至刻度,搖勻;精密量取5ml置25mg棕色量瓶中,用甲醇稀釋至刻度,搖勻,即得(每1ml中含丹參酮 Ⅱ A40μg)。
供試品溶液的制備 取本品10片,除去糖衣,精密稱定,研細(xì),取細(xì)粉約2g,精密稱定,置棕色量瓶中,加甲醇30ml,冷浸1小時(shí)后,超聲處理45分鐘,濾過(guò),取濾液,殘?jiān)性偌尤爰状?0ml,超聲處理45分鐘,濾過(guò),濾液合并,濃縮至約5ml,移至25ml棕色量瓶中,用甲醇少許分次洗滌容器,洗液并入25ml棕色量瓶中,并用甲醇稀釋至刻度,搖勻,即得。
測(cè)定法 精密吸取對(duì)照品溶液3、6、9、12、15μl,注入高效液相色譜儀,測(cè)定,以峰面積為縱坐標(biāo),濃度為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。精密吸取供試品溶液10μl,注入液相色譜儀,測(cè)定。按標(biāo)準(zhǔn)曲線法計(jì)算,即得。 本品每片含丹參酮 ⅡA(C19H25O3)不得少于50μg。