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亞葉酸鈣測定

方法名稱: 亞葉酸鈣原料藥-亞葉酸鈣-高效液相色譜法

應(yīng)用范圍: 本方法采用高效液相色譜法測定亞葉酸鈣原料藥中亞葉酸鈣的含量。

本方法適用于亞葉酸鈣原料藥。

方法原理: 供試品加水溶解并定量稀釋,進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離,用紫外吸收檢測器,于波長280nm處檢測亞葉酸鈣的峰面積,計算出其含量。

試劑: 1. 甲醇

2.含0.1%四丁基氫氧化銨的磷酸氫二鈉緩沖液

取10%四丁基氫氧化銨水溶液8.0mL和磷酸氫二鈉2.2g加水溶解使成780mL,并用磷酸調(diào)節(jié)pH值至7.8。

儀器設(shè)備: 1.儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑,理論塔板數(shù)按亞葉酸鈣峰計算應(yīng)不低于1000。

1.3 紫外吸收檢測器

2.色譜條件

2.1 流動相:甲醇 含0.1%四丁基氫氧化銨的磷酸氫二鈉緩沖液=22 78

2.3 柱溫:40℃

試樣制備: 1含0.1%四丁基氫氧化銨的磷酸氫二鈉緩沖液

取10%四丁基氫氧化銨水溶液8.0mL和磷酸氫二鈉2.2g加水溶解使成780mL,并用磷酸調(diào)節(jié)pH值至7.8。

2. 對照品溶液的制備

精密稱取亞葉酸鈣對照品適量,加水溶解并定量稀釋制成每1mL中約含0.1mg的溶液,即為對照品溶液。

3. 供試品溶液的制備

精密稱取供試品適量,加水溶解并定量稀釋制成每1mL中約含0.1mg的溶液,即為供試品溶液。

注:“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對該體積移液管的精度要求。

操作步驟: 分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各10mL,注入高效液相色譜儀,用紫外吸收檢測器于波長280nm處測定亞葉酸鈣(C20H21CaN7O7·5H2O)的峰面積,計算出其含量。

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