照高效液相色譜法（附錄Ⅴ D）測(cè)定。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 用硅膠為填充劑；以石油醚（60～90℃）-乙酸乙酯-三氯甲烷（44:42:14）為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為265nm。取本品適量，用流動(dòng)相溶解并稀釋制成每1ml中約含0.1mg的溶液，取上述溶液于太陽(yáng)光或鎢燈光下照射0.5小時(shí)后，產(chǎn)生一定量反式阿法骨化醇，精密量取20μl注入液相色譜儀，反式阿法骨化醇峰對(duì)阿法骨化醇峰的相對(duì)保留時(shí)間約為0.92，阿法骨化醇峰與反式阿法骨化醇峰的分離度應(yīng)符合要求；另取上述溶液2ml，于80℃水浴加熱回流2小時(shí)，放冷，產(chǎn)生一定量前阿法骨化醇，精密量取20μl注入液相色譜儀，前阿法骨化醇峰對(duì)阿法骨化醇峰的相對(duì)保留時(shí)間約為1.3，阿法骨化醇峰與前阿法骨化醇峰的分離度應(yīng)符合要求。理論板數(shù)按阿法骨化醇峰計(jì)算不低于2000。

測(cè)定法 取本品適量，精密稱定，用流動(dòng)相溶解并定量稀釋制成每1ml中約含1μg的溶液，精密量取20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取阿法骨化醇對(duì)照品適量，精密稱定，同法測(cè)定，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，即得。