(一)糞便檢查:從糞便中檢出蟲卵或孵出毛蚴可能診和考核療效。但輕度感染者,晚期患者及語治療未愈合,糞中卵數(shù)很少,檢出率低,故糞檢陰性不能排除血吸蟲病。
(二)腸粘膜活體組織檢查:按常規(guī)將乙狀結(jié)腸鏡或直腸鏡由肛門插入,先肉眼觀察腸粘膜的改變。急性期以充血水腫為主,慢性期則粘膜蒼白、肥厚及瘢痕形成。各期均可見典型的小結(jié)、小斑。然后夾取疑含蟲卵結(jié)節(jié)的粘膜病變組織,壓于兩載玻片之間鏡檢。對未經(jīng)治療的患者,檢出的蟲卵不論死活,均有確診價值;對有治療史的患者的,則只有查見活卵或近期變性卵才有診斷意義。
(三)免疫學檢查,包括環(huán)卵沉淀反應試驗、尾蚴膜反應、蟲卵抗原間接血凝試驗、血吸蟲循環(huán)抗原(CAg)等。
(四)病原學檢查
1、糞便檢查:從糞便中檢出蟲卵或孵出毛蚴可能診和考核療效。但輕度感染者,晚期患者及語治療未愈合,糞中卵數(shù)很少,檢出率低,故糞檢陰性不能排除血吸蟲病。
(1)直接涂片法:檢出效果甚低,只能發(fā)現(xiàn)感染度較重的早期患者。挑取膿血粘液部分作涂片,可增加檢出機會。
(2)沉孵法:
①自然沉淀法:此法優(yōu)于直接涂片法,但糞中蟲卵少的患者仍是漏診。以竹棒挑取糞便約30g(雞蛋大?。┓欧艧瓋?nèi),加少量清水,以玻璃調(diào)成糊狀,再加較多清水稀釋糞便。置銅絲篩于錐形量杯上,傾糞液入篩過濾,再以少量清水中洗篩內(nèi)糞渣1~2次。在錐菜量杯內(nèi)加清水至杯口處,靜置20分鐘,傾去上層液體留下糞渣,如此反復換水至上液變清為止。傾去最后一次上層液后,用吸管取少量糞渣作涂片3張鏡檢蟲卵。
②毛蚴孵化法:如用自然沉淀法鏡檢陰性者可進一步用此法。將糞渣全部傾入250或125ml的三角燒瓶內(nèi),加清水距瓶口約1cm.(適宜的酸堿度為pH7.2~7.6)。置燒瓶于20~30℃有燈光的孵箱內(nèi),如室溫高達20℃以上,可置室內(nèi)向光處孵化。經(jīng)4小時扣開始用肉眼、放大鏡觀察,毛蚴呈灰白色,點狀,常在近水面處作直線運動,經(jīng)24小時仍無毛蚴發(fā)現(xiàn)始可認為是陰性。
2、腸粘膜活體組織檢查:按常規(guī)將乙狀結(jié)腸鏡或直腸鏡由肛門插入,先肉眼觀察腸粘膜的改變。急性期以充血水腫為主,慢性期則粘膜蒼白、肥厚及瘢痕形成。各期均可見典型的小結(jié)、小斑。然后夾取疑含蟲卵結(jié)節(jié)的粘膜病變組織,壓于兩載玻片之間鏡檢。對未經(jīng)治療的患者,檢出的蟲卵不論死活,均有確診價值;對有治療史的患者的,則只有查見活卵或近期變性卵才有診斷意義。
(五)免疫診斷:
1、環(huán)卵沉淀反應試驗:是以血吸血整卵為抗原的特異免疫血清學試驗。卵內(nèi)毛蚴或胚胎分泌排泄的抗原物質(zhì)經(jīng)卵殼微孔滲出與試樣血汪肭的特異抗體結(jié)合,可在蟲卵周圍形成特殊的復合物沉淀,在光鏡下判讀反應強度并計數(shù)反應卵的百分率稱環(huán)沉率。常規(guī)法用載波片或凹玻片進行,加樣本血清后,挑取適量鮮卵或于卵(100~150個,從感染動物肝臟分離),覆蓋24×24mm蓋片,四周用石蠟密封,置37℃恒溫中48小時后,低倍鏡觀察結(jié)果,必要時需觀察72小時后的反應結(jié)果。典型的陽性反應為泡狀、指狀、片狀或細長卷曲狀的的折光性沉淀物,邊緣整齊,與卵殼牢固粘連。陰性反應必須看完全片,陽性者觀察100個成熟卵計算環(huán)率及反應強度比例。分級強度判讀:“+”為卵周出現(xiàn)泡狀、指狀沉淀物的面積小于卵周面積的的1/4,醫(yī)學教、育網(wǎng)收集,整理 片狀沉淀物小于1/2,細長曲帶狀沉淀物不足卵的長徑。“++”為泡狀、指狀淀物總面積大于卵周積1/4,片狀沉淀物大于1/2,曲帶狀沉淀物相當于或超過卵的長徑。“+++”為泡狀、指狀沉淀物大于周積的1/2,片狀物面積等于或超過卵的大小,曲帶狀沉狀物超過卵長徑數(shù)倍。
血吸蟲干卵抗原片(或膜片)環(huán)卵沉淀試驗是所近年來研制的一種改良方法,利用環(huán)卵抗原活性物質(zhì)的耐熱特性,將分離的純卵經(jīng)超聲和熱處理,定量滴加、烤干固定載玻片或預制的聚乙烯薄膜片。此種干卵膜片,保存時間較長(4℃半年),已有市售商品。試驗時只需加入血清試樣,濕盒內(nèi)孵育,判讀結(jié)果與常規(guī)法相同。干卵膜片法還具有簡化操作規(guī)程,提高卵抗原的規(guī)范要求,并可長期保存等優(yōu)點。
2、尾蚴膜反應:取受試者2滴血清10條左右的尾蚴在玻片上混和后,加蓋玻片封以石蠟,置25℃恒溫中經(jīng)24小時后在低倍鏡下觀察,陽性反應為尾蚴周圍有膠狀膜形成。血清滅活后反應減弱,保存3天以上的血清需加補體,目前認為此反應是部分依賴補體的抗原抗體反應。對新感染病例本試驗早期診斷價值較大,陽性率為95%以上。在無再感染機會的情況下,尾蚴膜反應抗體可自然下降,而造成較多的假陰性,故對基本消滅地區(qū)的陳舊感染不宜以本試驗為查病方法。在感染禽類尾蚴的稻田皮炎患者,可出現(xiàn)交叉反應,應避免在稻田皮炎發(fā)生季節(jié)進行試驗。其轉(zhuǎn)陽性時間較環(huán)卵沉淀反應為遲,故應用考核療效的參考價值不大。
3、蟲卵抗原間接血凝試驗:間接血凝陽性反應糞便檢陽性為早,且敏感性高。高戊二醛固定人“O”型紅細胞或綿羊紅細胞,經(jīng)鞣酸處理后,再用凍干血吸蟲卵冷浸抗原液致敏,然后冰凍干燥,經(jīng)凍干后的抗原在4℃下可保存1年以上。試驗時在耳垂或手指采血6滴,僅需一滴血清分別以不同稀釋度,在血凝板上和2.5%紅細胞懸液一滴搖勻,室溫下靜置15~30分鐘后觀察結(jié)果。如受檢血清有相應蟲卵抗體,則出現(xiàn)凝集反應。稀釋度1:10陽性有診斷意義,陽性率95%以上,反應強度愈大,糞檢查易檢出。低滴度陽性可能出現(xiàn)假陽性,假陽性率為1%~3.5%.與肺吸蟲的交叉反應較高,可達14%~84.2%.由于血吸蟲病患者的血清對肺吸蟲抗原在補體結(jié)合試驗中不存在交叉反應,可借此予以鑒別。間接血凝試驗操作簡便,識別結(jié)果迅速,是大規(guī)模現(xiàn)場普查的敏感性查病方法之一。
4.蟲循環(huán)抗原(CAg):最早是在日本血吸蟲患者普查的敏感性查病方法之一。