單個(gè)補(bǔ)體成分的測(cè)定
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單個(gè)補(bǔ)體成分的測(cè)定
C3、C4、C1q、B因子和C1酯酶抑制物等,常被作為單個(gè)補(bǔ)體成分的檢測(cè)指標(biāo)。常用免疫溶血法檢測(cè)單個(gè)補(bǔ)體成分的活性;基于抗原抗體反應(yīng)的血清學(xué)法(免疫化學(xué)法)測(cè)定其含量。目前應(yīng)用自動(dòng)化免疫散射比濁法可準(zhǔn)確測(cè)定體液中C3、C4等多個(gè)單一的補(bǔ)體成分。
一、 免疫溶血法
該方法中抗原為SRBC,抗體為兔或馬抗SRBC的抗體(IgG、IgM型),即溶血素。試驗(yàn)中有兩組補(bǔ)體參與,一組缺少待測(cè)成分的試劑(R試劑)。加入致敏SRBC(檢測(cè)經(jīng)典途徑補(bǔ)體成分用)或兔紅細(xì)胞RRBC(檢測(cè)替代途徑補(bǔ)體成分用)后,不發(fā)生溶血。另一組為待測(cè)血清中的補(bǔ)體,當(dāng)加入待測(cè)血清,補(bǔ)體成分齊全,產(chǎn)生溶血。溶血程度與待測(cè)補(bǔ)體成分活性有關(guān),仍以50%溶血為終點(diǎn)。該法不是檢測(cè)某補(bǔ)體成分的具體含量,而是檢測(cè)其活性。
二、 免疫化學(xué)法
分為單向免疫擴(kuò)散、火箭免疫電泳、透射比濁法和散射比濁法。后兩種方法可通過儀器對(duì)補(bǔ)體的C3、C4、B因子等單個(gè)成分進(jìn)行自動(dòng)化測(cè)定。待測(cè)血清標(biāo)本中的C3、C4成分,經(jīng)適當(dāng)稀釋后與相應(yīng)抗體反應(yīng)形成復(fù)合物,反應(yīng)介質(zhì)中的PEG可使該復(fù)合物沉淀,儀器對(duì)復(fù)合物產(chǎn)生的光散射或透射信號(hào)進(jìn)行自動(dòng)檢測(cè),并換算成所測(cè)成分的濃度單位。
該法是借助補(bǔ)體的抗原性和與相應(yīng)抗體反應(yīng)的前帶原理建立的補(bǔ)體單個(gè)成分定量檢測(cè)法。利用前帶原理必須以過量的抗補(bǔ)體抗體保證準(zhǔn)確測(cè)定的質(zhì)量。其簡(jiǎn)單、特異、重復(fù)性好、自動(dòng)化程度高。
自動(dòng)免疫比濁法可反映所測(cè)補(bǔ)體成分的絕對(duì)量,并能進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化流程管理與質(zhì)量控制,是目前國(guó)內(nèi)外臨床免疫檢測(cè)中的主要檢測(cè)方法。
備考神器:助考之星題庫(kù)
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