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糖鏈結(jié)構(gòu)測(cè)定方法

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糖鏈結(jié)構(gòu)測(cè)定方法:

要測(cè)定糖鏈的結(jié)構(gòu)主要是解決三個(gè)問題:?jiǎn)翁堑慕M成、糖與糖的連接位置和順序、苷鍵的構(gòu)型。

(一)分子量的測(cè)定

苷的分子量測(cè)定目前大多采用質(zhì)譜法。但由于其極性大導(dǎo)致熱揮發(fā)性差,電子轟擊法(EI)和化學(xué)電離(CI)常不能得到理想的結(jié)果,一般采用場(chǎng)解吸(FD)、快原子轟擊(FAB)、電噴霧(ESI)等方法獲得準(zhǔn)分子離子峰。

(二)單糖的鑒定

首先要了解苷中糖鏈由哪些單糖所組成,各種單糖之間的比例如何。一般是將苷鍵全部酸水解醫(yī)學(xué)教育|網(wǎng)編輯整理,然后用紙色譜檢出單糖的種類。經(jīng)顯色后用薄層掃描儀求得各種糖的分子比。單糖的定性定量也可以通過(guò)苷全甲基化并水解后得到的甲基化單糖的氣相色譜測(cè)定,但需要各種各樣的甲基化單糖作標(biāo)準(zhǔn)品。

(三)單糖之問連接位置的確定

將苷全甲基化,然后水解苷鍵,鑒定所有獲得的甲基化單糖,其中游離的一OH的部位就是連接位置。水解要盡可能溫和,否則會(huì)發(fā)生去甲基化反應(yīng)和降解反應(yīng)。

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主講老師:劉 楝老師

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