瘧原蟲的基本生活及其診斷是檢驗(yàn)士考試需要了解的知識(shí)點(diǎn)，醫(yī)學(xué)|教育網(wǎng)搜集整理了相關(guān)資料，便于各位同學(xué)復(fù)習(xí)備考！

人體四種瘧原蟲的生活史基本相同?，F(xiàn)以間日瘧原蟲生活史為例，具體如下：

1.在人體內(nèi)發(fā)育 瘧原蟲在人體內(nèi)先后經(jīng)在肝細(xì)胞和紅細(xì)胞內(nèi)發(fā)育。在肝細(xì)胞內(nèi)為裂體增殖，稱紅細(xì)胞外期（紅外期）；在紅細(xì)胞內(nèi)發(fā)育包括紅細(xì)胞內(nèi)裂體增殖期（紅內(nèi)期）和配子體形成的有性期開始。（1）紅細(xì)胞外期（exo-erythrocytic，stage）：蚊唾腺內(nèi)含有瘧原蟲子孢子的雌性按蚊刺吸人血時(shí)，子孢子隨蚊的唾液進(jìn)入人體，約30分鐘孢子侵入肝細(xì)胞。子孢子入侵肝細(xì)胞是由于子孢子表面有一種蛋白（環(huán)子孢子蛋白，CSP）能與肝細(xì)胞表面的瘧原蟲受體相結(jié)合，使兩者接觸。然后，子孢子釋放由棒狀體內(nèi)貯存的分泌物，作用于接觸的肝細(xì)胞膜，而主動(dòng)侵入肝細(xì)胞。在肝細(xì)胞內(nèi)，蟲體中部呈球狀突出，前后端收縮，呈圓形，轉(zhuǎn)變?yōu)樽甜B(yǎng)體（trophozoite）。以后，核開始分裂，進(jìn)行裂體增殖，形成裂殖體（schizont）。裂殖體逐漸長(zhǎng)大，反復(fù)進(jìn)行核分裂，至一定程度胞質(zhì)也分裂，分別包繞核，形成許多裂殖子（merozoite），即為成熟裂殖體（mature schizont）。感染第七天的間日瘧原蟲的成熟裂殖體，直徑約42μm，胞質(zhì)內(nèi)有空泡，內(nèi)含裂殖子約12000個(gè)。裂殖子圓形或橢圓形，大小為0.3～0.7μm，由核和少量的胞質(zhì)組成。當(dāng)裂殖體發(fā)育成熟后，被寄生的肝細(xì)胞破裂，裂殖子散出，進(jìn)入血竇，一部分裂殖子被吞噬細(xì)胞吞噬而消失，一部分則侵入紅細(xì)胞內(nèi)發(fā)育。

Lysenko等援引Moshkovsky（1973）的學(xué)說提出，間日瘧原蟲的子孢子在進(jìn)入肝細(xì)胞后，在發(fā)育繁殖的速度上可能是多態(tài)的（polymorphism），即有發(fā)育快的，稱速發(fā)型子孢子（tachysporozoites，TS）；和發(fā)育慢的，稱為遲發(fā)型子孢子（bradysporozoites，BS）。Krotoski（1980，1982）通過對(duì)食蟹猴瘧原蟲（P.cynomolgi bastianellii）的實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)其子孢子接種猴后3～5天，在肝細(xì)胞內(nèi)原蟲直徑為4μm，第7天達(dá)5μm，但此后直至感染后105天其大小仍無改變。提出該種瘧原蟲子孢子有兩個(gè)類型，一是進(jìn)入肝細(xì)胞后迅速發(fā)育繁殖，產(chǎn)生許多裂殖子，在感染后7～8天侵入血流，進(jìn)行紅細(xì)胞內(nèi)發(fā)育；另一型進(jìn)入肝細(xì)胞后發(fā)育慢，經(jīng)不同時(shí)間的休眠期，然后被激活，發(fā)育為裂殖體并繼續(xù)分裂為裂殖子，再進(jìn)入血流。作者將后者，經(jīng)休眠期的瘧原蟲稱之為休眠子（hypnozoite）。以后進(jìn)一步證實(shí)間日瘧原蟲也有休眠期，并認(rèn)為休眠子與瘧疾復(fù)發(fā)有關(guān)系。

（2）紅細(xì)胞內(nèi)期（erythrocytic stage）：由肝細(xì)胞釋放出的紅細(xì)胞外期裂殖侵入紅細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行裂體增殖，稱為紅細(xì)胞內(nèi)期（紅內(nèi)期）。包括滋養(yǎng)體和裂殖體兩個(gè)階段。瘧原蟲經(jīng)Giemsa染劑或Wright染劑染色，光學(xué)顯微鏡觀察，核為紫紅色或紅色，胞質(zhì)為藍(lán)色，瘧色素不著色，仍呈棕褐色（彩圖1）。

1）滋養(yǎng)體（trophozoite）：是瘧原蟲在紅細(xì)胞內(nèi)攝取營養(yǎng)和發(fā)育的階段。當(dāng)裂殖子侵入紅細(xì)胞后，蟲體胞質(zhì)較少，中間出現(xiàn)大空泡，胞質(zhì)呈環(huán)狀，細(xì)胞核位于蟲體一側(cè)，頗似戒指的寶石。因此，早期滋養(yǎng)體又稱為環(huán)狀體（ring form）。環(huán)狀體繼續(xù)發(fā)育，長(zhǎng)大。間日瘧原蟲和卵形瘧原蟲約經(jīng)8～10小時(shí)，惡性瘧原蟲約經(jīng)10小時(shí)，三日瘧原蟲約經(jīng)24小時(shí)，蟲體增大，伸出偽足，為運(yùn)動(dòng)細(xì)胞器，同時(shí)胞質(zhì)中出現(xiàn)少量瘧色素（malarial pigment）；隨著蟲體繼續(xù)發(fā)育，瘧色素增多，偽足活動(dòng)增加，出現(xiàn)多種形態(tài)，蟲體有1或2～3個(gè)空泡。受染的紅細(xì)胞脹大可達(dá)1倍，顏色變淡，并出現(xiàn)能染成淡紅色的小點(diǎn)，稱薛氏小點(diǎn)（Schüffner‘s dots）。惡性瘧原蟲的早期滋養(yǎng)體在外周血液中經(jīng)十幾小時(shí)的發(fā)育，逐漸隱匿于各種器官組織的毛細(xì)血管中，繼續(xù)發(fā)育成滋養(yǎng)體。

2）裂殖體（schizont）：約經(jīng)40小時(shí)，間日瘧原蟲晚期滋養(yǎng)體發(fā)育成熟，蟲體變圓，胞質(zhì)內(nèi)空泡消失，核開始分裂，稱未成熟裂殖體（immature schizont）。之后核繼續(xù)分裂，胞質(zhì)隨之分裂，瘧色素漸趨集中。最后，分裂的每一小部分胞質(zhì)包繞一個(gè)胞核，形成裂殖子。這時(shí)含有裂殖子的蟲體稱為成熟裂殖體。間日瘧原蟲的成熟裂殖體常充滿于被寄生的紅細(xì)胞，最近形成12～24個(gè)裂殖子。裂殖子長(zhǎng)約1.5μm，寬約1μm.在紅細(xì)胞受染后48小時(shí)左右，形成成熟裂殖體。此時(shí)紅細(xì)胞出現(xiàn)泡狀隆起，脹大而失去其雙凹面形狀。由于裂殖子的運(yùn)動(dòng)，導(dǎo)致紅細(xì)胞破裂，裂殖子逸出進(jìn)入血漿。從紅細(xì)胞釋出裂殖子的全過程約需1分鐘。在血液中的裂殖子，一部分被吞噬細(xì)胞吞噬，一部分侵入健康的紅細(xì)胞，重復(fù)裂體增殖過程。

（3）配子體形成：瘧原蟲經(jīng)過幾次紅細(xì)胞內(nèi)裂體增殖，部分裂殖子在紅細(xì)胞內(nèi)不再進(jìn)行裂體增殖，而發(fā)育為雌性配子體（female gametocyte，即macrogamete cyte）或雄性配子體（male gametocyte，即microgametocyte），這是瘧原蟲有性生殖的開始。間日瘧原蟲配子體呈圓形或橢圓形，瘧色素均勻分布于蟲體內(nèi)，核1個(gè)。雌性配子體胞質(zhì)致密，色深藍(lán)，蟲體較大，占滿脹大的紅細(xì)胞；核稍小，深紅色，多位于蟲體一側(cè)。雄性配子體胞質(zhì)淺藍(lán)而略帶紅色；核較大，淡紅色，多位于蟲體的中央。成熟的雌雄配子體如被適宜的按蚊隨同血液吸入蚊胃后，即可繼續(xù)發(fā)育。否則經(jīng)一定時(shí)間后即變性，而被吞噬細(xì)胞吞噬。

四種瘧原蟲寄生的紅細(xì)胞時(shí)期不同。間日瘧原蟲和卵形瘧原蟲主要寄生于網(wǎng)織紅細(xì)胞，三日瘧原蟲多寄生于較衰老的紅細(xì)胞，而惡性瘧原蟲可寄生于各時(shí)期的紅細(xì)胞。配子體在人體末梢血液中開始出現(xiàn)的時(shí)間也有差別。間日瘧原蟲在裂體增殖期出現(xiàn)2～3天后可在末梢血液中查見到配子體，而惡性瘧原蟲則在7～10天之后。

實(shí)驗(yàn)診斷

1.病原學(xué)診斷

厚、薄血膜染色鏡檢是目前最常用的方法。從受檢者外周血液中檢出瘧原蟲是確診的最可靠依據(jù)，最好在服藥以前取血檢查。取外周血制作厚、薄血膜，經(jīng)姬氏或瑞氏染液染色后鏡檢查找瘧原蟲。薄血膜中瘧原蟲形態(tài)完整、典型，容易識(shí)別和鑒別蟲種，但原蟲密度低時(shí)，容易漏檢。厚血膜由于原蟲比較集中，易檢獲，但染色過程中紅細(xì)胞溶解，原蟲形態(tài)有所改變，蟲種鑒別較困難。因此，最好一張玻片上同時(shí)制作厚、薄兩種血膜，如果在厚血膜查到原蟲而鑒別有困難時(shí)，可再檢查薄血膜。惡性瘧在發(fā)作開始時(shí)，間日瘧在發(fā)作后數(shù)小時(shí)至10余小時(shí)采血能提高檢出率。

2.免疫學(xué)診斷

（1）循環(huán)抗體檢測(cè)：常用的方法有間接熒光抗體試驗(yàn)、間接血凝試驗(yàn)和酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)等。由于抗體在患者治愈后仍能持續(xù)一段時(shí)間，且廣泛存在著個(gè)體差異，因此檢測(cè)抗體主要用于瘧疾的流行病學(xué)調(diào)查、防治效果評(píng)估及輸血對(duì)象的篩選，而在臨床上僅作輔助診斷用。

（2）循環(huán)抗原檢測(cè)：利用血清學(xué)方法檢測(cè)瘧原蟲的循環(huán)抗原能更好地說明受檢對(duì)象是否有活動(dòng)感染。常用的方法有放射免疫試驗(yàn)、抑制法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)和快速免疫色譜測(cè)試卡 （ICT）等。

3.分子生物學(xué)技術(shù) PCR和核酸探針已用于瘧疾的診斷，分子生物學(xué)檢測(cè)技術(shù)的最突出的優(yōu)點(diǎn)是對(duì)低原蟲血癥檢出率較高。用核酸探針檢測(cè)惡性瘧原蟲，其敏感性可達(dá)感染紅細(xì)胞內(nèi)0.0001%的原蟲密度。國內(nèi)學(xué)者采用套式 PCR技術(shù)擴(kuò)增間日瘧原蟲 SSU rRNA基因120bp的特定片段，其敏感性達(dá)0.1原蟲/μl血。