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口蹄疫如何檢測(cè):
1.蹄疫反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR),用于檢測(cè)疑似感染動(dòng)物水皰皮或水皰液中所有血清型口蹄疫病毒,適用于口蹄疫病毒的檢測(cè)、診斷和流行病學(xué)調(diào)查。
原理:利用異硫氰酸胍方法提取RNA,在反轉(zhuǎn)錄酶的作用下,以RNA為模板,以引物為起點(diǎn)合成與RNA模板互補(bǔ)的CDNA鏈。利用DTC型基因擴(kuò)增儀,在TaqDNA聚合酶的作用下,經(jīng)高溫變性、低溫退火、中溫延伸的循環(huán),使特異性DNA片段的基因拷貝數(shù)放大一倍。經(jīng)過(guò)35個(gè)循環(huán),最終使基因放大數(shù)百萬(wàn)倍。將擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行電泳,經(jīng)溴化乙錠染色后,在紫外燈照射下,肉眼可見(jiàn)DNA片段的擴(kuò)增帶。該方法可以檢測(cè)所有亞型的口蹄疫病毒,檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性,需進(jìn)一步采用分型診斷試劑盒進(jìn)行進(jìn)一步檢測(cè)醫(yī)學(xué)教|育網(wǎng)搜集整理。
2.血清學(xué)試驗(yàn),ELISA是目前檢測(cè)FMDV感染較為常用的診斷方法,其與補(bǔ)結(jié)試驗(yàn)、中和試驗(yàn)及間接血凝抑制、免疫擴(kuò)散沉淀試驗(yàn)相比較、具有靈敏、快速、價(jià)廉等優(yōu)點(diǎn)。
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