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玉潔純、硫酸鋅對口腔主要致齲菌生長產(chǎn)酸的影響

  玉潔純(triclosan),化學(xué)名三氯羥苯醚(2’,由于玉潔純低毒性、低刺激性的特點(diǎn),自80年代末90年代初被考慮用于口腔疾病的治療。玉潔純能有效地抑制菌斑的形成,并有抗炎、減少牙石沉積的多重作用,因此它較多地被考慮用于牙齦炎、牙周炎的防治。作為溫和的非離子型抗菌劑,玉潔純對致齲菌也應(yīng)具有效的抑制作用,但有關(guān)這方面的報道較為少見。

  本研究采用體外細(xì)菌學(xué)實(shí)驗(yàn)方法觀察不同濃度的玉潔純和常與之配伍使用的硫酸鋅對口腔主要致齲菌變形鏈球菌、遠(yuǎn)緣鏈球菌生長和產(chǎn)酸的抑制效果,確定抑制所需的濃度,為研制新型的防齲制劑提供理論依據(jù)醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)搜集整理。

  1材料與方法

  1.1制劑準(zhǔn)備

  玉潔純:〔汽巴精化(中國)有限公司提供〕,因玉潔純難溶于水,因此先將其溶于丙二醇中,再用蒸餾水對半稀釋加入培養(yǎng)基。硫酸鋅:ZnSO4。7H2O(上?;瘜W(xué)試劑總廠提供),溶于蒸餾水對半稀釋加入培養(yǎng)基。

  1.2細(xì)菌培養(yǎng)

  選用國際參考菌株變形鏈球菌(SteptococcusmutansIngbritt,S.mIng)、遠(yuǎn)緣鏈球菌(Streptococcussobrinus6715,S.m6715)和變形鏈球菌、遠(yuǎn)緣鏈球菌的臨床分離菌株各4株。臨床分離菌株已經(jīng)涂片鏡檢、生化鑒定、葡聚糖凝聚實(shí)驗(yàn)及DNAG+C定量測定鑒定為變形鏈球菌及遠(yuǎn)緣鏈球菌。冷凍保存的菌株活化后轉(zhuǎn)種胰蛋白酶消化大豆培養(yǎng)基,微需氧,φ(N2)=90%,φ(CO2)=5%,37℃培養(yǎng)18h。

  1.3生長抑制實(shí)驗(yàn)

  實(shí)驗(yàn)藥品:①玉潔純原液質(zhì)量濃度自0.005g/L連續(xù)對半稀釋5次至0.00016g/L;②硫酸鋅原液質(zhì)量濃度自2.5g/L連續(xù)對半稀釋5次至0.08g/L;③配伍藥液:玉潔純與硫酸鋅質(zhì)量濃度由低到高相對配伍。

  保存的細(xì)菌經(jīng)活化后,取培養(yǎng)物于無菌離心管2500r/min離心,用生理鹽水洗滌兩次制成懸液,置紫外分光光度計調(diào)整菌濃度為吸光度值等于1(λ=450nm)。

  抑制組:用無菌微量加樣器吸取不同濃度的藥液各0.1ml,分別加入滅菌的4ml蛋白胨酵母葡萄糖培養(yǎng)基中,加樣順序由低濃度到高濃度;藥液加畢后再在每試管中加入0.4ml菌液,振蕩混勻,微需氧φ(N2)=90%、φ(CO2)=5%、37℃培養(yǎng)48h后取出。培養(yǎng)物經(jīng)旋渦混合器混勻,通過紫外分光光度計測定吸光度值,并計算生長抑制率:

  陽性對照組:培養(yǎng)基中不加藥液只加菌液。陰性對照:培養(yǎng)基中只加藥液不加菌液。

  1.4產(chǎn)酸抑制實(shí)驗(yàn)

  在測定了各培養(yǎng)基細(xì)菌的生長抑制情況后,原培養(yǎng)基用酸度計(pH-3C型,上海雷磁儀器廠)測定培養(yǎng)液的pH值。

  2結(jié)果

  玉潔純、硫酸鋅以及它們的配伍對S.m、S.sob的國際參考菌株和臨床分離菌株都有顯著的抑制作用,抑制效果見圖1~6。

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