摘 要：目的建立狂犬病毒血清中和抗體效價的快速檢測方法，以實現(xiàn)狂犬疫苗免疫效果的定量評價，指導(dǎo)高危人群及動物種群的免疫預(yù)防。

　　方法 采用常規(guī)方法建立雜交瘤細(xì)胞株并制備抗狂犬病毒核蛋白單抗，以親和層析法進(jìn)行純化，異硫氰酸熒光黃標(biāo)記制備熒光抗體；以BHK-21細(xì)胞系培養(yǎng)狂犬病毒細(xì)胞適應(yīng)株CVS-11，以染毒細(xì)胞測定熒光抗體的工作濃度后，通過熒光抗體染色法測定CVS-11細(xì)胞半數(shù)感染量（TCID50）；利用狂犬病毒滅活疫苗免疫犬制備抗狂犬病毒血清，并以國際獸疫局標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行標(biāo)定；參考世界衛(wèi)生組織及國際獸疫局推薦方法，確定中和試驗程序，對51份樣品血清進(jìn)行測定，并與國際狂犬病參考實驗室的檢測結(jié)果進(jìn)行比較，評價其精確及可靠程度。以Kaber法公式和Microsoft Excel（R）軟件為基礎(chǔ)，設(shè)計被測樣品中和效價計算方法。

　　結(jié)果 制備的抗狂犬病毒核蛋白單抗的亞型為IgG2a；純化、標(biāo)記后的熒光抗體工作濃度為1：400；CVS-11株的使用量為每孔100 TCID50；本研究建立的檢測程序?qū)?1份人及犬血清測得的中和效價結(jié)果與國際參考實驗室的測定結(jié)果一致；自行設(shè)計的計算方法操作簡便，計算快捷。

　　結(jié)論 成功建立了與國際標(biāo)準(zhǔn)相當(dāng)?shù)目袢《局泻涂贵w效價測定和計算方法。