自從Coulter血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀問(wèn)世之后，血細(xì)胞計(jì)數(shù)及其近年來(lái)的全自動(dòng)分析得到迅速發(fā)展，許多廠家已研制并推出白細(xì)胞5分類(lèi)的血細(xì)胞分析儀，而溶血?jiǎng)┑慕M合及其質(zhì)量起著關(guān)健作用，現(xiàn)將有關(guān)問(wèn)題綜述如下。

　　1 溶血?jiǎng)┡c血細(xì)胞自動(dòng)化分析

　　現(xiàn)代自動(dòng)血細(xì)胞分析儀聯(lián)合運(yùn)用了阻抗和射頻技術(shù)來(lái)進(jìn)行5分類(lèi)白細(xì)胞計(jì)數(shù)，白細(xì)胞檢測(cè)系統(tǒng)可分為淋巴、單核、粒細(xì)胞檢測(cè)系統(tǒng)，嗜酸粒細(xì)胞檢測(cè)系統(tǒng)，嗜堿粒細(xì)胞檢測(cè)系統(tǒng)，以及幼稚細(xì)胞檢測(cè)系統(tǒng)，各個(gè)白細(xì)胞檢測(cè)系統(tǒng)均需使用特異的溶血?jiǎng)?

　　1.1 淋巴、單核、粒細(xì)胞檢測(cè)系統(tǒng)，此系統(tǒng)所使用的溶血?jiǎng)┑娜苎饔幂^輕，溶血?jiǎng)┲械谋砻婊钚詣┐┩讣?xì)胞膜，僅使少量的胞漿溢出，對(duì)細(xì)胞核的皺縮作和也較為輕微，細(xì)胞的形態(tài)改變不大，檢測(cè)系統(tǒng)采用了電阻抗和射頻技術(shù)來(lái)聯(lián)合檢測(cè)，檢測(cè)系統(tǒng)根據(jù)所產(chǎn)生的DC和RF信號(hào)的差異，通過(guò)掃描技術(shù)來(lái)得出細(xì)胞所占比例。

　　1.2 嗜酸粒細(xì)胞檢測(cè)系統(tǒng)，此系統(tǒng)所使用的溶血?jiǎng)┠芴禺愋缘娜芙馐人嵝约?xì)胞之外的細(xì)胞，含有完整嗜酸粒細(xì)胞的液體通過(guò)小孔時(shí)，計(jì)數(shù)電路產(chǎn)生脈沖計(jì)數(shù)。

　　1.3 嗜堿粒細(xì)胞檢測(cè)系統(tǒng) 原理和嗜酸粒細(xì)胞檢測(cè)系統(tǒng)相同，也要使用本系統(tǒng)專(zhuān)用的溶血?jiǎng)?

　　1.4 幼稚白細(xì)胞檢測(cè)系統(tǒng) 幼稚白細(xì)胞膜上的脂質(zhì)較成熟白細(xì)胞為少，本檢測(cè)系統(tǒng)所使用的溶血?jiǎng)┲泻心芄袒?xì)胞膜和胞漿的硫化氨基酸，由于脂質(zhì)的成分、含量及在細(xì)胞膜上的占位不同，結(jié)合在幼稚白細(xì)胞上的硫化氨基酸較成熟白細(xì)胞為多，使胞膜和漿都固化，對(duì)溶血?jiǎng)┲芯哂腥苎饔玫木奂兹┓请x子表面活性劑具有抵抗作用，加入溶血?jiǎng)┖?，成熟白?xì)胞被溶解，而幼稚白細(xì)胞得以保存，溶血?jiǎng)┲兴械年庪x子表面活性劑使殘留的細(xì)胞影和成熟白細(xì)胞核收縮，進(jìn)一步突出了幼稚白細(xì)胞與成熟白細(xì)胞核的對(duì)比程度。本系統(tǒng)采用RF/DC探測(cè)方法檢測(cè)幼稚白細(xì)胞，一般來(lái)說(shuō)，細(xì)胞越原始，它的RF信號(hào)就越低，在IMI通道的散布曲線圖上，它們經(jīng)常出現(xiàn)在下面的特定區(qū)域。

　　2 表面活性劑和溶血?jiǎng)┑年P(guān)系

　　用血細(xì)胞自動(dòng)分析儀測(cè)定白細(xì)胞，必須使用溶血?jiǎng)┤芙饧t細(xì)胞以消除對(duì)白細(xì)胞計(jì)數(shù)的影響，在大多數(shù)情況下，使用的溶血?jiǎng)┒及斜砻婊钚詣┏煞?。常使用的溶血?jiǎng)㏒ulfolyser（用SDS-Hb法的溶血?jiǎng)┲邪斜砻婊钚詣┦腔蛩徕c。

　　表面活性劑的功能能溶解細(xì)胞膜的表面活性劑在血液分析中被用于白細(xì)胞計(jì)數(shù)和血紅蛋白分析，常用來(lái)溶解紅細(xì)胞的表面活性劑十二磺基硫酸鈉，可以和Hb形成穩(wěn)定的SLS-Hb用作比色分析。十二磺基硫酸鈉，可以代替氰化物，其主要特點(diǎn)是無(wú)毒，有利于環(huán)境保護(hù)。盡管溶血?jiǎng)┲斜砻婊钚詣┑闹饕δ苁侨芙饧t細(xì)胞，然而離散功能也是另外的一個(gè)重要功能，紅細(xì)胞溶解后會(huì)形成影細(xì)胞（ghost cell）,如影細(xì)胞聚集在一起，會(huì)干擾白細(xì)胞的測(cè)定，具有離散功能的表面活性劑可離散聚集在一起的影細(xì)胞，表面活性劑具有廣泛的特性和使用用途，從而可以選擇合適的表面活性劑來(lái)滿(mǎn)足預(yù)想中的用途。在陽(yáng)離子表面活性劑中，季胺鹽提供了強(qiáng)大的抗菌效果，可用于試劑的防腐，有的表面活性劑還可穩(wěn)定顆粒的大小，以防止內(nèi)容物的降解，能降低表面張力的表面活性劑可添加在試劑中以防止氣泡的產(chǎn)生。 醫(yī)學(xué)教.育網(wǎng)搜集

　　3 表面活性劑的組成及特性

　　表面活性劑包含有具有不同特征的兩個(gè)或多個(gè)功能區(qū)，以肥皂分子（一種典型的表面活性劑）為例，包含有長(zhǎng)鏈的疏水碳?xì)浠衔锖透叨扔H水的羥基，表面活性劑根據(jù)其主要新水基團(tuán)的離子種類(lèi)分為：陰離子型、陽(yáng)離子型、兩性型和非離子型，隨著親水基團(tuán)和疏水基團(tuán)的不同，表面活性劑的特性具有很大的不同，它們具有廣泛的功能，包括：清潔、溶解、分散、乳化，催化及減少表面張力等。

　　4 表面活性劑溶解紅細(xì)胞膜的作用機(jī)制

　　4.1 陽(yáng)離子表面活性劑 紅細(xì)胞表面帶有負(fù)電荷，陽(yáng)離子表面活性劑通過(guò)靜電作用吸附于其表面，陽(yáng)離子表面活性劑溶解磷脂的能力10倍于陰離子表面活性劑，然而具有長(zhǎng)鏈的碳?xì)浠衔锏年庪x子表面活性劑比陽(yáng)離子表面活性劑的溶解效率更高，這提示除了磷脂的溶解外，還有其他機(jī)制介入細(xì)胞膜溶解。陽(yáng)離子表面活性劑作用于磷脂，把它們和蛋白質(zhì)分離開(kāi)來(lái)，而導(dǎo)致細(xì)胞膜的溶解。

　　4.2 陰離子表面活性劑 陰離子表面活性劑不能通過(guò)靜電作用吸附于細(xì)胞膜表面，但具有長(zhǎng)鏈?zhǔn)杷鶊F(tuán)的表面活性劑可拮抗其和細(xì)胞膜之間的靜電排斥力而吸附于其表面，其作用機(jī)制可能是通過(guò)離子和疏水鍵作用吸附于膜蛋白上，當(dāng)它改變了蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)后，就導(dǎo)致了細(xì)胞膜的溶解。 醫(yī).學(xué)教.育網(wǎng)搜.集整理

　　4.3 非離子表面活性劑 一些非離子表面活性劑，以Triton X-100為代表，具有很強(qiáng)的溶解能力，非離子表面活性劑的吸附和溶解機(jī)理還不十分清楚。Sasaki等人報(bào)道了具有龐大親水基團(tuán)的表面活性劑仍位于脂質(zhì)層的一側(cè)，而有小親水基團(tuán)的表面活性劑則能穿透過(guò)脂質(zhì)層，他們還描述了當(dāng)表面活性劑濃度加大時(shí)，有龐大親水基團(tuán)的表面活性劑能與脂質(zhì)膜上的磷脂形成膠質(zhì)粒子，溶解了脂質(zhì)，據(jù)此推理，非離子表面活性劑以相同機(jī)制溶解紅細(xì)胞膜。

　　5 IMI通道在臨床的新運(yùn)用

　　盡管IMI通道在SE-9000中運(yùn)用的原意是用來(lái)檢測(cè)幼稚白細(xì)胞，而美國(guó)Loma Linda大學(xué)和日本Osaka大學(xué)在1995年報(bào)道了此通道也可用來(lái)檢測(cè)干細(xì)胞。在醫(yī)學(xué)治療領(lǐng)域的新方法中，外周血干細(xì)胞移植（PBSCT）提供了一種有潛力代替骨髓移植的新方法，外周血干細(xì)胞移植通常需要0.5×105CFU-GM(粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞-集落生成單位)/kg量,為了取得足量的干細(xì)胞,需要準(zhǔn)確預(yù)測(cè)最佳干細(xì)胞收獲時(shí)間,最理想的方法是對(duì)干細(xì)胞定量,然而應(yīng)用流式細(xì)胞技術(shù)和CFU-GM集落鑒定術(shù)需要相對(duì)較高的成本和很長(zhǎng)的時(shí)間,而應(yīng)用SE-9000和其他相類(lèi)似儀器的IMI通道來(lái)監(jiān)測(cè)IMI陽(yáng)性細(xì)胞,就可以知道最佳外周血干細(xì)胞收獲時(shí)間,其特點(diǎn)是快速和價(jià)格低廉。

　　綜上所述，血細(xì)胞分析儀的發(fā)展日新月異，現(xiàn)代自動(dòng)血細(xì)胞分析儀已使白細(xì)胞5分類(lèi)自動(dòng)計(jì)數(shù)和幼稚白細(xì)胞計(jì)數(shù)成為可能，這些功能的實(shí)施除依賴(lài)于儀器的電子和機(jī)械技術(shù)的革新外，新型溶血?jiǎng)┑膽?yīng)用也是其中的重要因素之一。如上所述，表面活性劑在溶血?jiǎng)┲衅鹬匾饔茫砻婊钚詣┳饔糜诩?xì)胞膜的機(jī)制非常復(fù)雜，開(kāi)發(fā)出一種能應(yīng)用于臨床的試劑往往需要無(wú)數(shù)次的基礎(chǔ)研究。新型溶血?jiǎng)┑恼Q生往往帶來(lái)血液自動(dòng)分析的革新，我們應(yīng)給予溶血?jiǎng)┑陌l(fā)展以足夠的重視。