1.樣品的采集和處理

　　血清、肝素鋰抗凝血漿、汗、糞便、尿及胃腸液均可作為測定鈉鉀樣品。血清或血漿可在2～4℃或冰凍保存。鉀測定結(jié)果明顯受溶血的干擾，因?yàn)榧t細(xì)胞中鉀比血漿鉀高二十幾倍，故樣品嚴(yán)格防止溶血。血漿鉀比血清低0.1～0.7mmol／L，這種差別是由于凝血過程中血小板破裂釋放鉀之故。全血未及時(shí)分離或冷藏均可使血鉀上升。采血前患者肌活動(dòng)，如仰臥、握拳等，可使血鉀上升。

　　采集尿樣時(shí)，由于尿液易腐敗、變性，并受飲水和晝夜影響，故應(yīng)收集24小時(shí)尿進(jìn)行測定，冷藏保存或加防腐劑。

　　2.方法學(xué)

　?。?）火焰光度法測定：Na⁺、K⁺測定可采用火焰光度法，火焰光度法是一種發(fā)射光譜分析法，利用火焰中激發(fā)態(tài)原子回降至基態(tài)時(shí)發(fā)射的光譜強(qiáng)度進(jìn)行含量分析，可檢測血清、尿液、腦脊液及胸腹水的Na⁺和K⁺，該方法屬于經(jīng)典的標(biāo)準(zhǔn)參考法，優(yōu)點(diǎn)是結(jié)果準(zhǔn)確可靠，廣為臨床采用。

　　通常采用的定量方法有標(biāo)準(zhǔn)曲線法、標(biāo)準(zhǔn)加入法和內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)法。內(nèi)標(biāo)法是標(biāo)本及標(biāo)準(zhǔn)液采用加進(jìn)相同濃度的內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)元素進(jìn)行測定，一般是加入鋰內(nèi)標(biāo)，測定的是鋰／鈉或鋰／鉀電流的比值，而不是單獨(dú)的鈉或鉀的電流，這樣，可減小燃?xì)夂突鹧鏈囟炔▌?dòng)等因素引起的誤差，因而有較好的準(zhǔn)確性。

　?。?）化學(xué)測定法：目前Na+和K+的化學(xué)測定主要利用復(fù)環(huán)王冠化合物如穴冠醚或球冠醚，亦稱為冠醚，均為離子載體進(jìn)行測定，由于大環(huán)結(jié)構(gòu)內(nèi)有空穴，分子內(nèi)部氧原子有未共用電子對可與金屬離子結(jié)合，根據(jù)空穴大小，可選擇性結(jié)合不同直徑的金屬離子，從而可達(dá)到測出離子濃度的目的。

　　Cl-的化學(xué)測定法：采用Fe存在下，Hg（SCN）₂與Cl^-反應(yīng)生成與Cl^-等當(dāng)量的SCN^-，再與鐵結(jié)合成Fe（SCN）的紅色化合物，進(jìn)行比色，定量標(biāo)本中Cl^-的含量。該法測定時(shí)，血清中性因素如F、Br和I也可以起反應(yīng)；其量很少，故可忽略不計(jì)。某些藥物及膽紅素均對其有影響。以上比色法均可在自動(dòng)生化分析儀進(jìn)行批量測定，屬臨床常用的一種方法。

　?。?）離子選擇電極法（ISE法）：離子選擇電極是一種電化學(xué)傳感器，其結(jié)構(gòu)中有一個(gè)對特定離子具有選擇性響應(yīng)的敏感膜，將離子活度轉(zhuǎn)換成電位信號(hào)，在一定范圍內(nèi)，其電位與溶液中特定離子活度的對數(shù)呈線性關(guān)系，通過與已知離子濃度的溶液比較可求得未知溶液的離子活度，按其測定過程又分為直接測定法和間接測定法，目前大部分采用間接測定法，由于間接測定法將待測樣本稀釋后測定，所測離子活度更接近離子濃度。

　　ISE法具有標(biāo)本用量少，快速準(zhǔn)確，操作簡便等優(yōu)點(diǎn)。是目前所有方法中最為簡便準(zhǔn)確的方法。缺點(diǎn)：電極具有一定壽命，使用一段時(shí)問后，電極會(huì)老化。

　?。?）整合滴定法：Cl^-可采用特定的整合劑滴定法進(jìn)行，Molrr法：以KrCrO^-₄為指示劑，用AgN0₃滴定血清中Cl^-。Sehales法：以二苯卡巴腙作指示劑，用Hg（N0₃）2滴定血清中Cl^-。滴定法需要熟練的操作，終點(diǎn)要準(zhǔn)確，盡可能排除主觀因素的干擾，否則誤差很大。

　　血清中過多的膽紅素、血脂及血紅蛋白（溶血）對結(jié)果干擾很大。滴定過程中易受多種因素影響、難以得到準(zhǔn)確的結(jié)果，目前已很少應(yīng)用。

　?。?）酶法：酶法測定鈉的原理是利用鈉依賴的β-半乳糖苷酶催化人工底物ONPG（鄰硝基酚β-D-吡喃半乳糖苷）；分解釋放出有色產(chǎn)物鄰硝基酚，在波長420nm處測吸光度變化。

　　酶法測鉀的原理是利用對丙酮酸激酶的激活作用，后者催化磷酸烯醇式丙酮酸變?yōu)槿樗嵬瑫r(shí)伴有還原型輔酶Ⅰ的消耗，在波長340nm處測NADH的吸光度下降。

　　酶法測氯的原理是利用氯使α-淀粉酶與鈣離子結(jié)合變成有活性的形式，然后與α-和β-葡萄糖苷酶共同催化人工合成底物2-氯4-硝基苯酚-口-D麥牙庚糖苷（CNP-G7）使其水解產(chǎn)生2-氯4-硝基苯酚，此產(chǎn)物在波長405nm處有最大吸收，血氯濃度與”淀粉酶活性成正比，同時(shí)也與2-氯4-硝基苯酚的生成量成正比。酶法的優(yōu)點(diǎn)是不需特殊儀器，缺點(diǎn)是價(jià)格較貴。

　　鉀、鈉的測定方法有：火焰光度法、離子選擇電極法、冠醚法和酶法。

　　氯的測定方法有：離子選擇電極法、硫氰酸汞比色法、硝酸汞滴定法和電量分析法（庫侖滴定法）。