小腸結腸炎耶爾森菌:
一、細菌的傳播與致病
小腸結腸炎耶爾森菌廣泛分布于自然界,是能在冷藏溫度下生長的少數(shù)幾種腸道致病菌之一。本菌天然寄居在多種動物體內,如豬、鼠、家畜等,通過污染食物(牛奶、豬肉等)和水經(jīng)糞—口途徑感染或因接觸染疫動物而感染。它除引起胃腸道癥狀外,還能引起呼吸系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)、骨骼結締組織等疾患,甚至可引起敗血癥,造成死亡。該菌還是重要的食源性致病菌,很多國家都已將該菌列為進出口食品的常規(guī)檢測項目。
本病多發(fā)生于冬春季節(jié),可散發(fā)或暴發(fā)流行,多累及嬰兒及兒童。不同年齡患者的癥狀有所不同,5歲以下患兒以腹瀉為多見,臨床表現(xiàn)與菌痢不能區(qū)別。本病為自限性的輕型急性胃腸炎,一般表現(xiàn)為腹瀉、發(fā)熱和腹痛,糞便呈黃色水樣或含粘液,帶血或血便者較少見,腹瀉每日3~10次,可持續(xù)1~2周,個別可長達3個月。偶可引起腸道潰瘍、穿孔和腹膜炎。慢性腹瀉常持續(xù)數(shù)月,甚至可擬似慢性特發(fā)性炎性腸病。發(fā)熱從短期高熱到持續(xù)幾周的低熱不等,亦為本病的突出癥狀。5歲以上兒童和青少年常有下腹痛,末梢血白細胞總數(shù)增加,癥狀極似闌尾炎。在成人中,腸炎后1~2周,有的可出現(xiàn)結節(jié)性紅斑,常見的并發(fā)癥為活動性關節(jié)炎。此外,尚有腦膜炎及敗血癥等臨床類型。
但國內既往對該菌重視不夠,醫(yī)務人員普遍缺乏對本菌的認識,臨床醫(yī)生在對胃腸道疾病診斷時很少考慮小腸結腸炎耶爾森菌感染,檢驗人員也很少能為準確診斷提供依據(jù)。由于診斷不及時,容易造成誤診,多數(shù)小腸結腸炎耶爾森菌感染病人很難得到及時、針對性治療,造成感染慢性化和并發(fā)各種合并癥,有些小腸結腸炎耶爾森菌感染甚至被當作闌尾炎施行手術。
二、細菌的生物學特性
小腸結腸炎耶爾森菌腸桿菌科耶爾森菌屬,為革蘭氏陰性小桿菌,有毒菌株多呈球桿狀,無毒株以桿狀多見。對營養(yǎng)要求不高,能在麥康凱瓊脂上生長,但較其他腸道桿菌生長緩慢,培養(yǎng)的最適宜溫度為28℃,最適pH值為7~8,初次培養(yǎng)菌落為光滑型,通過傳代接種后菌落可能呈粗糙型。
本菌具有“嗜冷性”,在水中和低溫下(4℃)能生長,為腸道中能在4℃生長繁殖的少數(shù)細菌之一。因此,食品冷藏保存時,應防止被該菌污染。
野生動物、家畜(豬、狗和貓)、牡蠣和水源中都能分離到本菌,亦可從健康人或患者糞便中分離得到,其傳播方式可能與攝入被尿、糞便污染的食物(尤其是肉類)和接觸感染動物等有關。
本菌可產(chǎn)生耐熱腸毒素,121℃30分鐘不被破壞,對酸堿穩(wěn)定,pH1~11不失活。腸毒素產(chǎn)生迅速,在25℃下培養(yǎng)12小時,培養(yǎng)基上清液中即有腸毒素產(chǎn)生,24~48小時達高峰。腸毒素是引起腹瀉的主要因素。毒力型菌株均有VW抗原(蛋白脂蛋白復合物),為毒力的重要因子,與侵襲力有關,侵襲力可能是耶爾森菌感染腸道表現(xiàn)的病理基礎。
三、細菌的實驗室檢查及其它檢查
1.標本采集常為糞便以及食物,也可取血液和尿液等。
糞便標本采集要求:采集的動物糞便標本應新鮮,病人的糞便標本最好在發(fā)病3~5病日內,使用抗生素之前。糞便采集量每份不少于5克,置于干凈塑料袋或置于運送培養(yǎng)基中于6小時內送實驗室檢測,夏季標本的保存和運送要注意冷藏。原則上每天采集的標本可分兩次送至實驗室,即上午的標本中午12時前送到,下午的標本晚6時前送到,以便于及時開展檢測。
2.分離培養(yǎng)——以糞便標本為例
(1)冷增菌糞便與改良磷酸鹽緩沖液以1:10混合于4℃增菌,并于10天,20天分別轉種麥康凱MAC平板或耶爾森菌屬專用選擇性培養(yǎng)基CIN于25℃培養(yǎng)24~48h.
(2)該菌的菌落在MAC平板上呈無色透明,在CIN平板上呈粉紅色,偶爾有一圈膽鹽沉淀;
(3)將可疑菌落接種改良克氏雙糖培養(yǎng)基25℃培養(yǎng)24h~48h,上、下層均為陽性(即顯黃色)者接種Rustigian氏尿素培養(yǎng)基(使成濃厚菌懸液),振蕩10秒鐘25℃培養(yǎng)2~4h.
(4)尿素陽性者再接種半固體各2管,1管于25℃培養(yǎng)24h,另1管于37℃培養(yǎng)24h.該菌在25℃動力陰性,37℃動力陰性。
3.生化鑒定(25℃培養(yǎng)):典型小腸結腸炎耶爾森菌主要的生化反應情況:脲酶陽性、硫化氫陰性、VP25℃陽性、鳥氨酸脫羧酶陽性。發(fā)酵葡萄糖、蔗糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣,不發(fā)酵密二糖和鼠李糖。
4.血清分型
四、細菌的防治
癥狀較輕時,本病多為自限性,無需抗菌治療。宜進行適當隔離,糞便及排泄
物要消毒,以免疾病傳播。有失水者及時補液,以糾正水、電解質、酸堿紊亂。對病程較長,有并發(fā)癥或呈暴發(fā)型者,應給予抗菌治療。本菌對所有氨基糖甙抗生素、
多粘菌素、復方新諾明、四環(huán)素、呋喃唑酮和喹諾酮類等均敏感。
五、細菌的生物安全防護
根據(jù)《病原微生物生物實驗室生物安全管理條例》中的有關規(guī)定,人間傳播的微生物名錄(待頒布)小腸結腸炎耶爾森菌屬于三類,BSL~2.相關的防護事宜包括:
(1)操作要求
1、實驗時,未經(jīng)實驗室主任同意,限制或禁止進入實驗室。
2、不許在工作區(qū)域飲食、吸煙、清洗隱型眼鏡和化妝。食物應存放在工作區(qū)域以外專用櫥柜或冰箱中。
3、所有的操作過程應盡量細心,避免產(chǎn)生和濺出氣溶膠。
4、對于污染的銳器,必須時刻保持高度的警惕,包括針、注射器、玻片、加樣器等。
5、注射和吸取感染材料時,只能使用針頭固定注射器或一次性注射器(即注射器和針頭是一體的)。用過的一次性針頭必須彎曲、切斷、破碎、重新套上針頭套、從一次性注射器上去掉,或在丟棄前進行人工處理,要不將之小心放入不會被刺穿的、用于收集廢棄銳器的容器中。非一次性銳器必須放置在堅壁容器中,轉移至處理區(qū)消毒,最好高壓殺菌。
6、打碎的器皿不能直接用手處理,必須用其它工具處理,如刷子和簸箕、夾子或鑷
7、所有的培養(yǎng)物、儲存物及其它規(guī)定的廢物在釋放前,均應使用可行的消毒方法進行消毒,如高壓滅菌。轉移到就近實驗室消毒的物料應置于耐用、防漏容器內,密封運出實驗室。離開該系統(tǒng)進行消毒的物料,在轉移前應包裝,其包裝應符合有關的法規(guī)。
8、濺出或偶然事件中,明顯暴露于傳染源時,要立即向實驗室主任報告。進行適當?shù)尼t(yī)學評估、觀察、治療,保留書面記錄。
9、按日常程序、在有關傳染源的工作結束后、尤其是傳染源濺出或灑出后、或受到其他傳染源污染后,實驗室設備和工作臺面應當使用有效的消毒劑消毒。污染的設備在送去修理、維護前,要按照相關的規(guī)定消毒;在離開設施轉移前,要按照相關的規(guī)定打包運輸。
(2)安全設備
1、正確使用和保養(yǎng)生物安全柜、最好是二級生物安全柜、或其他合適的人員防護設施、或物理遏制裝置。
2、確定可能形成傳染性氣溶膠或濺出物的實驗過程,包括離心、研磨、勻漿、劇烈震蕩或混勻、超聲波破裂、開啟裝有傳染源的容器、采集感染標本等。
3、涉及高濃度或大體積的傳染源時,若選用密封轉頭或帶安全罩的離心機,若轉頭或安全罩僅在生物安全柜中打開,則可在開放實驗室內離心。
4、當必須在生物安全柜外處理標本時,需采取面部保護措施(跟鏡、口罩、面罩、或其他防濺裝置),以免傳染源或其他有害物濺或灑到面上。
5、在實驗室內,必須使用專用的防護性外衣、大褂、罩衫或制服。人員到非實驗室區(qū)域時,防護服必須留在實驗室內。防護服可以在實驗室內處理,也可以在洗衣房中洗滌,但不能帶回家中。