為方便廣大考生復(fù)習(xí),醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)整理了臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技士考試關(guān)于B細(xì)胞功能的檢測(cè)的相關(guān)內(nèi)容,以供參考。
1.空斑形成細(xì)胞(PFC)
檢測(cè)是體外檢測(cè)B細(xì)胞功能的一種方法。該法最早用于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的PFC測(cè)定。是以SRBC作為抗原免疫小鼠,從免疫小鼠脾臟分離淋巴細(xì)胞或直接用脾細(xì)胞,將其與高濃度SRBC混合于瓊脂中,經(jīng)37℃,5%CO2溫育后,在補(bǔ)體參與下抗體形成細(xì)胞周?chē)腟RBC溶解而形成溶血小區(qū),即溶血空斑(plaque)。一個(gè)空斑代表一個(gè)抗體形成細(xì)胞,空斑的數(shù)量表示抗體形成細(xì)胞的多少。IgM參與本反應(yīng),固定補(bǔ)體能力強(qiáng),可直接激活傳統(tǒng)途徑,導(dǎo)致SRBC溶解,稱直接法。若檢測(cè)其他類(lèi)別免疫球蛋白的抗體形成細(xì)胞,需在試驗(yàn)系統(tǒng)中加入相應(yīng)的第二抗體才能使SRBC溶解形成空斑,稱間接空斑形成試驗(yàn)。近年來(lái),已應(yīng)用SPA致敏的SRBC結(jié)合抗人球蛋白來(lái)檢測(cè)人的抗體形成細(xì)胞,此法稱SPA-SRBC溶血空斑試驗(yàn)。在此檢測(cè)系統(tǒng)中加入抗人Ig,能與受檢細(xì)胞產(chǎn)生的Ig結(jié)合成復(fù)合物,并通過(guò)復(fù)合物中抗人IgFc段與致敏SRBC上的SPA結(jié)合,激活補(bǔ)體而使SRBC溶解??瞻咝纬杉?xì)胞的檢測(cè),有助于免疫應(yīng)答動(dòng)力學(xué)的研究和探討藥物對(duì)機(jī)體免疫狀態(tài)的影響。是目前研究B細(xì)胞抗體產(chǎn)生功能的重要手段。
2.定量溶血分光光度法(QHS)
該法又稱B細(xì)胞介導(dǎo)的紅細(xì)胞定量溶血分光光度法,是根據(jù)溶血空斑試驗(yàn)的原理衍化而來(lái),醫(yī)學(xué)教|育網(wǎng)搜集整理可用以測(cè)定由B細(xì)胞產(chǎn)生和分泌的抗體裂解紅細(xì)胞所釋放的血紅蛋白(以吸光值表示),從而反映機(jī)體的體液免疫功能。試驗(yàn)時(shí),將免疫的脾細(xì)胞與SRBC及新鮮豚鼠血清等體積混合,于37℃水浴1小時(shí),離心后測(cè)上清吸光值,其與產(chǎn)生抗體的量成正比。
3.ELISA-空斑試驗(yàn)(ELISA-plaque assay)
又稱酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)試驗(yàn)(ELISPOT)。該法與ELISA不同之處是,加入的待檢標(biāo)本是細(xì)胞,而非可溶性物質(zhì);所使用的底物可形成不溶性終產(chǎn)物。ELISPOT不僅可應(yīng)用于B細(xì)胞分泌抗體功能的測(cè)定,也能檢測(cè)分泌細(xì)胞因子的T細(xì)胞和巨噬細(xì)胞?,F(xiàn)已有應(yīng)用該技術(shù)于計(jì)數(shù)類(lèi)風(fēng)濕因子分泌細(xì)胞的報(bào)道,但尚未在臨床推廣。
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