?、倩鶊F影響：C₁₁-酮基的反應速度快于C₁₁-羥基甾體；C₂₁-羥基酯化后較其母體羥基的反應速度慢；當酯化了的基團為三甲基醋酸酯、磷酸酯或琥珀酸酯時，反應更慢。

　　②溶劑和水分的影響：含水量大時會使呈色速度減慢，但含水量不超過5%時，對結果幾無影響，因此可采用95%乙醇。

　　③堿的種類及加入順序的影響：在各類堿中，采用氫氧化四甲基銨能得到滿意結果，故最為常用。以先加四氮唑鹽溶液再加堿液較好。

　?、芸諝庵醒跫肮饩€的影響：反應及其產(chǎn)物對光敏感，故應避光。

　?、轀囟扰c時間的影響：一般室溫或30℃恒溫條件下顯色。中國藥典多數(shù)醫(yī)學教育|網(wǎng)收集整理25℃暗處反應40～45min.