臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技師考試:《答疑周刊》2022年第4期
1.【問題】不完全抗體指的是?
【解答】不完全抗體也指免疫性抗體,主要由母嬰血型不合的妊娠及血型不合的輸血產(chǎn)生,以IgG為主,即在鹽水介質(zhì)中不能與含有相應(yīng)抗原的紅細(xì)胞出現(xiàn)肉眼可見的凝集反應(yīng)。
2.【問題】微量吸管怎樣校準(zhǔn)?
【解答】微量吸管校準(zhǔn):常用氰化高鐵血紅蛋白比色法。用同一抗凝血在同一條件下對標(biāo)準(zhǔn)微量吸管和待校準(zhǔn)微量吸管所吸血液進(jìn)行氰化高鐵血紅蛋白測定。由于微量吸管的容量不同,吸血量不同,生成的氰化高鐵血紅蛋白量也不同。氰化高鐵血紅蛋白吸光度與微量吸管體積成正比,將待校準(zhǔn)的微量吸管與標(biāo)準(zhǔn)微量吸管測得的吸光度進(jìn)行比較,計(jì)算出相對誤差,判斷其容量是否合格。
3.【問題】免疫印跡法的檢測原理是?
【解答】免疫印跡法是在蛋白質(zhì)電泳分離和抗原抗體檢測的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一項(xiàng)檢測蛋白質(zhì)的技術(shù),它將SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳的高分辨力與抗原抗體反應(yīng)的高特異性相結(jié)合。
第一階段為SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)。抗原等蛋白樣品經(jīng)SDS處理后帶負(fù)電荷,在聚丙烯酰胺凝膠中從陰極向陽極泳動,分子量越小,泳動速度就越快。此階段分離效果肉眼不可見(只有在染色后才顯出電泳區(qū)帶)。
第二階段為電轉(zhuǎn)移。此階段分離的蛋白質(zhì)條帶肉眼仍不可見。
第三階段為酶免疫定位。將印有蛋白質(zhì)條帶的硝酸纖維素膜(相當(dāng)于包被了抗原的固相載體)依次與特異性抗體和酶標(biāo)第二抗體作用后,加入能形成不溶性顯色物的酶反應(yīng)底物,使區(qū)帶染色。常用的HRP底物為3,3-二氨基聯(lián)苯胺(呈棕色)和4-氯-1-萘酚(呈藍(lán)紫色)。陽性反應(yīng)的條帶清晰可辨。并可根據(jù)SDS-PAGE時(shí)加入的分子量標(biāo)準(zhǔn),確定各組分的分子量。
4.【問題】精子總數(shù)的計(jì)數(shù)公式是什么?精子畸形的總數(shù)怎么算?
【解答】精確計(jì)數(shù)法:①血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)法:只能用于精子數(shù)量觀察,不能同時(shí)進(jìn)行精子活動率和活動度、運(yùn)動軌跡和速度等的檢查等。②Makler精子計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)法:簡便、快速,精液不需要稀釋,一次加樣不但可計(jì)數(shù)精子密度,還可分析精子的活動力和活動率。③計(jì)算機(jī)輔助精液分析(CASA):CASA系統(tǒng)是利用圖像和計(jì)算機(jī)視屏技術(shù)來進(jìn)行精子計(jì)數(shù),利用CASA計(jì)數(shù)精子簡單、快速,但易受精液中細(xì)胞成分和非精子顆粒物質(zhì)的影響。
血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)法:與血小板計(jì)數(shù)方法一樣,計(jì)數(shù)精子個(gè)數(shù)時(shí)要以精子的頭部為準(zhǔn)。
精子濃度=5個(gè)中方格內(nèi)精子總數(shù)×20×5×10×106
精子總數(shù)=精子濃度×精子量
精子畸形檢查一般用染色法:經(jīng)精液制成薄片,干燥與固定后進(jìn)行改良巴氏染色(也可以用吉姆薩染色)。油鏡下觀察計(jì)數(shù)200個(gè)精子,報(bào)告異常精子的百分率。
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