【關鍵詞】  Fascin

　　Expression of Fascin1 in human colorectal cancer and its significance

　　LIU Li， DING YanQing

　　Department of Pathology， Nanfang Hospital， Southern Medical University， Guangzhou 510515， China

　　【Abstract】 AIM： To investigate the correlation between Fascin1 expression and carcinogenesis and biological behavior of colorectal cancer （CRC）。 METHODS： The expression of Fascin1 was examined in 80 specimens of  CRC， 40 of paired normal colorectal mucosae and 37 of regional lymphatic metastases by immunohistochemical method. RESULTS： Fascin1 was expressed heterogeneously among the normal colorectal mucosae， CRC and lymphatic metastases （χ2＝30.917， P=0.000）。 Fascin1 was higher expressed in CRC compared with normal colorectal mucosae （Z=-3.912， P=0.000）， and Fascin1 expression was significantly stronger in lymphatic metastases than that in primary CRC （Z＝-2.419， P=0.016）。 Furthermore， Fascin1 expression in CRC with lymph node metastasis was higher than that in CRC without lymph node metastasis （Z=-2.432， P＝0.015）。 Expression levels of Fascin1 protein， showing no correlation with the differentiation of CRC （χ2＝0.333， P=0.847）， was positively correlated with the invasive depth of CRC （Z=-2.074， P=0.038）。 CONCLUSION： Fascin1 expression plays an important role in invasion and metastasis of CRC. Clinically it may be a useful indicator of the tumor invasion and metastasis in CRC.

　　【Keywords】 Fascin1； colorectal neoplesms； neoplasm invasiveness； lymphaticmetastasis

　　【摘要】 目的： 探討Fascin1蛋白表達與結(jié)直腸癌發(fā)生及其生物學行為的關系。  方法： 應用免疫組化SP法，檢測結(jié)直腸癌80例、正常黏膜40例以及結(jié)直腸癌區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移癌37例Fascin1蛋白的表達。 結(jié)果： 在結(jié)直腸正常黏膜、癌及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移癌中Fascin1蛋白表達差異有顯著性（χ2＝30.917， P=0.000）。 兩兩比較發(fā)現(xiàn)，癌組織Fascin1表達比正常黏膜強（Z=-3.912， P=0.000），淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移癌組織表達比原發(fā)結(jié)直腸癌組織強（Z＝-2.419， P=0.016）；在結(jié)直腸癌組織中，伴發(fā)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的結(jié)直腸癌組織比未發(fā)生轉(zhuǎn)移的結(jié)直腸癌組織Fascin1表達明顯增強，差異具有顯著性（Z=-2.432， P＝0.015）；并且，F(xiàn)ascin1蛋白表達水平與結(jié)直腸癌的浸潤深度呈正相關（Z=-2.074， P=0.038），而與結(jié)直腸癌的分化程度無關（χ2＝0.333， P=0.847）。 結(jié)論： Fascin1蛋白表達與結(jié)直腸癌的浸潤、轉(zhuǎn)移密切相關，可作為結(jié)直腸癌浸潤、轉(zhuǎn)移的指標。

　　【關鍵詞】 Fascin1；結(jié)直腸腫瘤；腫瘤浸潤；淋巴轉(zhuǎn)移

　　0引言

　　Fascin1蛋白的主要功能是與肌動蛋白結(jié)合，并將其捆綁成平行的肌動蛋白束，使細胞形成線狀或片足的突起，從而腫瘤細胞的運動性增加，侵襲轉(zhuǎn)移能力增強［1］。 Fascin1在人類的許多腫瘤中表達上調(diào)，如食道癌、胰腺癌等，并且與臨床病理學和預后不良相關［2］。 目前Fascin1在人結(jié)直腸癌中的表達與臨床病理的關系還不清楚，因此，我們采用免疫組化的方法檢測正常結(jié)直腸黏膜、結(jié)直腸癌以及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移癌組織中Fascin1表達情況，以探討Fascin1表達與結(jié)直腸癌的發(fā)生及生物學行為的關系。

　　1材料和方法

　　1.1材料200201/200412手術切除結(jié)直腸癌標本80例，男52例，女28例，年齡40~75（平均55）。 正常結(jié)直腸黏膜40例取自手術切除標本邊緣，區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移癌37例取自手術切除標本所附淋巴結(jié)。 全部標本術前均未接受化療及放療， 40 g/L中性甲醛固定，常規(guī)石蠟包埋，4 μm厚切片，分別進行HE染色和免疫組化檢測。

　　1.2方法應用免疫組化方法（SP法）檢測正常結(jié)直腸黏膜組織、結(jié)直腸癌組織以及區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移癌組織中Fascin1表達情況，并分析其與腫瘤細胞分化程度、浸潤深度及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的相關性。 鼠抗人Fascin1購自Chemicon公司，SP免疫組化試劑盒和DAB顯色試劑盒購自福州邁新公司。 免疫組化方法按照試劑盒操作說明書操作。 Fascin1抗體工作濃度為1∶400，DAB顯色，蘇木精復染，中性樹脂封固。 Fascin1在間質(zhì)的表達為自身切片的陽性對照，PBS液取代一抗作陰性對照。 結(jié)果判斷方法參照許良中等的方法［3］。 染色強度分數(shù)標準：無色為0分，淡黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分。 同樣物鏡下技術陽性細胞數(shù)，1%～10％為1分，11%～50%為2分，51%～75%為3分，>75%為4分。 兩項得分相乘，滿3分為“＋”；4分為“”；5分以上為“”。 “＋～”為陽性表達。

　　統(tǒng)計學方法：采用SPSS12.0統(tǒng)計軟件包進行數(shù)據(jù)處理，多組間比較采用非參數(shù)KruskalWallis檢驗，兩兩比較采用MannWhitney檢驗。

　　2結(jié)果

　　2.1Fascin1蛋白的表達Fascin1陽性產(chǎn)物主要位于胞質(zhì)內(nèi)，且在間質(zhì)中高表達（圖1），因此，在間質(zhì)中的表達可以作為內(nèi)對照。 Fascin1在正常結(jié)直腸黏膜、結(jié)直腸癌及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移癌組織3組中的表達明顯不同（表1），差異具有顯著性（χ2＝30.917， P<0.01）。 兩兩比較發(fā)現(xiàn)，癌組織Fascin1表達明顯比正常結(jié)直腸黏膜強（Z=-3.912， P<0.01），淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移癌組織陽性表達又明顯比癌組織表達強（Z=-2.419， P<0.05）。

　　A：正常黏膜陰性；B：癌陰性；C：癌陽性；D：淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移癌陽性。

　　圖1結(jié)直腸癌Fascin1蛋白表達SP×400（略）

　　2.2Fascin1表達與癌特性的關系Fascin1表達與結(jié)直腸癌組織學分化程度沒有相關性，F(xiàn)ascin1在高、中及低分化的癌組織中表達無顯著性差異（χ2＝0.333， P>0.05）。 但是隨著結(jié)直腸癌浸潤腸壁深度的增加，F(xiàn)ascin1表達的陽性率逐漸增強，浸潤至深肌層或全層的癌組織Fascin1表達陽性率明顯高于浸潤較淺的組織，差異具有顯著性（Z=-2.074， P<0.05）。 Fascin1表達與結(jié)直腸癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移顯著相關，有區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的結(jié)直腸癌Fascin1表達陽性率明顯高于無區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者（Z=-2.432， P<0.05）。

　　表1Fascin1在結(jié)直腸黏膜、結(jié)直腸癌及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移癌中的表達情況（略）

　　aP<0.05， bP<0.01  vs相應項目。

　　3討論

　　結(jié)直腸癌的進展和侵襲與癌細胞運動性增加和肌動蛋白細胞骨架結(jié)構(gòu)改變密不可分，三維的肌動蛋白微絲的結(jié)構(gòu)和功能是由眾多肌動蛋白捆綁蛋白（actinbundling protein）調(diào)節(jié)和控制［4］。 人Fascin1蛋白是交聯(lián)蛋白，定位于運動細胞形成釘狀突起和片狀突起的肌動蛋白束的核心。 Fascin1表達與腫瘤的高侵襲性呈正相關，如在食管癌、胃癌等，F(xiàn)ascin1表達都與腫瘤的進展相關，并且與預后不良和/或低的生存率正相關［5-6］。 Xie等［7］利用RNA干擾的方法沉默F(xiàn)ascin1的表達，發(fā)現(xiàn)食管癌細胞的增殖速度和侵襲性明顯降低。 在人結(jié)直腸癌，Jawhari等［8］發(fā)現(xiàn)癌組織Fascin1表達比正常結(jié)直腸黏膜明顯增強，但是他們沒有更深入的探討Fascin1與結(jié)直腸癌臨床病理學的聯(lián)系，因此，本研究進一步探討了Fascin1在人結(jié)直腸癌表達的臨床意義。 我們的結(jié)果顯示，F(xiàn)ascin1在正常結(jié)直腸黏膜幾乎不表達，原發(fā)結(jié)直腸癌Fascin1的表達明顯高于正常結(jié)直腸黏膜，支持了Jawhari等的研究結(jié)果。 我們還發(fā)現(xiàn)，浸潤至深肌層或全層的癌組織Fascin1表達陽性率明顯高于浸潤較淺的組織，提示隨著癌變的發(fā)生和發(fā)展，F(xiàn)ascin1蛋白表達逐漸增強。 此外，F(xiàn)ascin1表達與結(jié)直腸癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移顯著相關，有區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的結(jié)直腸癌Fascin1表達陽性率明顯高于無區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者，轉(zhuǎn)移癌Fascin1表達水平明顯高于原發(fā)癌，說明Fascin1的表達與腫瘤轉(zhuǎn)移密切相關。 我們的結(jié)果沒有發(fā)現(xiàn)Fascin1的表達與腫瘤的分化相關。 Fascin1在腫瘤組織中表達上調(diào)的分子機制還不清楚，因此，需要更為深入大規(guī)模實驗來證實Fascin1在腫瘤中的作用及其分子機制。

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