
細(xì)胞因子在機(jī)體免疫應(yīng)答過程中起著十分重要的作用。在某些疾病時,體內(nèi)細(xì)胞因子及其受體表達(dá)可發(fā)生異常,與機(jī)體免疫功能低下或發(fā)生病理損傷有關(guān)。因此,在臨床免疫學(xué)中越來越重視對細(xì)胞因子及其受體的檢測。在基礎(chǔ)免疫研究中,常需檢測不同條件培養(yǎng)液中細(xì)胞因子的活性,并探討細(xì)胞因子產(chǎn)生水平與免疫細(xì)胞表型、增殖、殺傷及其它功能的關(guān)系。此外,原核細(xì)胞和真核細(xì)胞中表達(dá)的重組細(xì)胞因子或經(jīng)過不同工藝純化后的產(chǎn)品需測定其活性和含量。
從細(xì)胞因子及其受體檢測的水平來說,可以分為 基因組 DNA、mRNA和蛋白三個不同的水平,后者又包括胞漿內(nèi)、膜表面以及分泌到體液或培養(yǎng)上清等三種不同形式細(xì)胞因子。目前應(yīng)用最多的是檢測體液或培養(yǎng)豐清中的細(xì)胞因子以及膜表面的細(xì)胞因子受體。
這里簡單介紹一下生物活性檢測法
細(xì)胞因子生物學(xué)活性檢測法是根據(jù)某些細(xì)胞因子特定的生物學(xué)活性,應(yīng)用相應(yīng)的指示系統(tǒng)和標(biāo)準(zhǔn)品來反映待測標(biāo)本中某種細(xì)胞因子的活性水平,一般以活性單位來表示。生物學(xué)檢測法一般敏感性較高,直接表示待測標(biāo)本中的活性水平。但實驗周期較長,如集落形成法需10~14;易受 細(xì)胞培養(yǎng) 中某些因素的影響,如血清、pH、藥物;易受生物學(xué)活性相同或相近的其它細(xì)胞因子的影響,如檢測IL-2時可受IL-4的干擾,TNF-α和TNF-β(淋巴毒素)表現(xiàn)出極為相似的生物學(xué)作用;易受待栓樣品中某些細(xì)胞因子抑制物的干擾,如IL-1活性可被IL-1受體拮抗物(IL-1ra)所抑制,TNF-α可被TNF-BP所阻斷;不能區(qū)分某些細(xì)胞因子的型和亞型,如IFN-α、β和γ,以及IFN-α中不同的亞型顯示相同的生物學(xué)活性;某些指示細(xì)胞長期培養(yǎng)易發(fā)生突變;不同指示細(xì)胞對同一種細(xì)胞因子的敏感性不同,所慕名而來結(jié)果難于標(biāo)準(zhǔn)化;此外,某些人源的細(xì)胞因子如hIL-2對小鼠細(xì)胞起作用,但鼠源性的IL-2對人的細(xì)胞則無刺激作用。
生物學(xué)檢測的方法大致可分為增殖或增殖抑制、集落形成、直接殺傷靶細(xì)胞、保護(hù)靶細(xì)胞免受病毒攻擊、趨化作用以及抗體形成法等幾類。
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