化學致突變物的檢測是公衛(wèi)執(zhí)業(yè)醫(yī)師衛(wèi)生毒理學要求掌握的內容，醫(yī)學教育網(wǎng)搜集整理相關內容供大家參考。

　　化學致突變物的檢測所觀察的現(xiàn)象并不一定就是三類遺傳學損傷，而可能是致突變過程中發(fā)生的其他作用（事件）。

　?。ㄒ唬┲峦蛔冊囼灥倪z傳學終點和試驗組合的選擇

　　將致突變試驗觀察到的現(xiàn)象所反映的各種遺傳學事件稱為遺傳學終點。遺傳學終點分為4類：①基因突變；②染色體畸變；③不分離；④原發(fā)性DNA損傷。

　　成組試驗組合的原則為：①多個遺傳學終點；②原核生物和真核生物；③體外試驗和體內試驗；④體細胞和生殖細胞。

　　（二）常用的致突變試驗方法

　　1.細菌回復突變試驗-鼠傷寒沙門菌回變試驗（Ames試驗）

　　原核生物體外試驗、基因突變。

　　鼠傷寒沙門菌試驗菌株（突變型）不能自行合成組氨酸，在不含組氨酸的最低營養(yǎng)平皿上不能生長。突變型試驗菌株可被各種誘變因素誘導，回復突變成野生型，即恢復了合成組氨酸的能力，可在此平皿上生長成可見菌落。

　　鼠傷寒沙門菌野生型（原養(yǎng)型）←→組氨酸營養(yǎng)缺陷型突變株（his+）　回復突變?。╤is）

　　如果受試物處理組回變菌落數(shù)顯著超過陰性對照組；并有劑量反應關系，即可判定受試物為鼠傷寒沙門菌的致突變物。

　　Ames試驗中使用的標準菌株為TA97、TA98、TA 100和TA 102.his-突變外，附加突變：①深粗糙型突變（rfa）、②切除修復基因uvrB缺失（△uvrB）和③抗藥因子（R因子即抗氨芐青霉素的PKMl01質粒和抗四環(huán)素的PAQ1質粒）。醫(yī)學教育網(wǎng)搜集整理

　　TA97和TA98主要用于檢測移碼型突變；TA100和TA102可檢測堿基置換。

　　有點試驗和摻入試驗兩種。應分別進行不加及加代謝活化系統(tǒng)的試驗，常用為S9混合液，即用多氯聯(lián)苯誘導的大鼠肝勻漿經9000 g離心得到的上清液，再加上NADP及葡萄糖-6-磷酸等輔助因子。

　　2.微核試驗

　　體內試驗，遺傳學終點是染色體畸變和不分離。

　　微核是染色體斷片或因紡錘體受損傷而遲滯的整個染色體，分裂的后期仍留在子細胞的胞質內。檢測斷裂劑和有絲分裂毒物。

　　常用的是嚙齒類動物骨髓嗜多染紅細胞。在主核排出時微核可留在胞漿中。

　　3.染色體畸變試驗

　　細胞遺傳學檢驗，即制備中期相染色體標本，在光鏡下觀察染色體形態(tài)結構和數(shù)目改變。遺傳學終點為染色體畸變。

　　嚙齒類動物睪丸細胞染色體畸變試驗，用于檢測對生殖細胞的染色體損傷作用。

　　4.程序外DNA合成試驗

　　DNA受損后，發(fā)生在正常復制合成期（S期）以外DNA的修復合成，稱為程序外DNA合成（UDS）或DNA修復合成。

　　3H-胸苷摻入量，反映DNA修復合成情況。需將受試細胞分裂阻斷同步化于G1期，再用羥基脲抑制殘存的S期半保留DNA復制，放射自顯影法和液閃計數(shù)法確定3H-胸苷摻入量。