研究已證明,牙菌斑中產(chǎn)酸菌代謝糖生成有機(jī)酸致牙齒脫礦,是致齲的直接原因。但由于齲齒的發(fā)生是由多種因素決定的,單一的因素并不能全面反映齲病的發(fā)生或進(jìn)行過(guò)程。一些學(xué)者報(bào)道患齲者菌斑中有機(jī)酸的含量高于無(wú)齲者或無(wú)差異,但并不能確定造成這種現(xiàn)象的原因是菌斑產(chǎn)酸量的差異還是口腔對(duì)酸的緩沖和清除能力的差異。我們用高效毛細(xì)管電泳法分析個(gè)體患者牙菌斑中幾種短鏈有機(jī)酸的含量,比較高活動(dòng)齲者和無(wú)齲者體內(nèi)和體外菌斑產(chǎn)酸量的差異,以期對(duì)前述問(wèn)題有所回答。
材料和方法
1.受試者:分別在美國(guó)波士頓和北京選擇42例受試者,均為在校大學(xué)生,年齡20歲左右。波士頓組:無(wú)齲6例;活動(dòng)性齲9例,DMFS≥10。北京組:無(wú)齲15例;活動(dòng)性齲12例,DMFS≥8。
2.菌斑產(chǎn)酸實(shí)驗(yàn):囑受試者78h不刷牙,菌斑取樣前10h以上不進(jìn)食,分別進(jìn)行下述實(shí)驗(yàn)。①口內(nèi)菌斑代謝糖前后菌斑液的提取(波士頓組):分別用10%蔗糖漱口(1min)前和漱口后7min獲取全口(除去下頜前牙)菌斑樣品,離心得個(gè)體菌斑液,待測(cè)。②體外菌斑代謝糖后菌斑外液的提取(波士頓組):臨床取菌斑,在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)加等量10%蔗糖液于菌斑表面,37℃孵育1h,直接離心取上清液(菌斑外液),待測(cè)。③體外菌斑代謝糖前后菌斑提取液中有機(jī)酸的變化(北京組):臨床取菌斑,在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)加等量10%蔗糖液混勻,37℃孵育1h,樣品經(jīng)超聲粉碎10s(60Hz,末端輸出6,美國(guó)科默公司4710型超聲粉碎儀),再離心取上清液(菌斑提取液),待測(cè)醫(yī)學(xué)教育 網(wǎng)搜集整理。
3.有機(jī)酸分析:方法見(jiàn)另文報(bào)道。分別使用毛細(xì)管電泳儀PACE205(波士頓組)和SpectraPhoresis500(北京組)分析測(cè)定有機(jī)酸,包括乳酸、乙酸、丙酸、丁酸、琥珀酸、丙酮酸和甲酸。兩地分析用的流動(dòng)相為十四烷基三甲基溴化銨(TTAB),pH5.5。
結(jié)果
波士頓組受試者停止刷牙72h并禁食10h以后的菌斑液和用10%蔗糖漱口后7min鐘菌斑液中的6種有機(jī)酸水平見(jiàn)表1。丙酮酸的水平位于儀器的檢測(cè)下限,未列于表中。
上述波士頓組受試者再次停止刷牙72h并禁食10h以后,獲得的菌斑在實(shí)驗(yàn)室與糖反應(yīng)1h,測(cè)得菌斑外液的4種主要有機(jī)酸水平見(jiàn)表2。因設(shè)備的原因,此組未計(jì)算甲酸、丁酸和丙酮酸含量。
北京組受試者停止刷牙72h并禁食10h以后,所獲菌斑在實(shí)驗(yàn)室與糖反應(yīng)1h,測(cè)菌斑提取液中7種有機(jī)酸水平并與同一個(gè)體未進(jìn)行糖反應(yīng)者比較,見(jiàn)表3。