（1）準備　將滅菌鍋放在2000瓦電爐上，或放在有足夠火力的煤氣灶、煤爐上，向鍋內(nèi)加水至水位標記線為止。將準備滅菌的培養(yǎng)基及空玻璃器皿用牛皮紙包好，裝入鍋內(nèi)套層中，物品放置不宜過多，過擠，鍋內(nèi)應(yīng)留出三分之一空間。然后蓋嚴鍋蓋，采用對角式均勻擰緊鍋蓋上的螺旋，關(guān)閉鍋蓋上的氣閥。

　　（2）加熱　點燃熱源，開始加熱。當鍋蓋上的壓力表達到0.5千克/厘米2時，打開放氣閥，排凈鍋內(nèi)冷空氣，直到壓力表回降到“0”時，關(guān)閉氣閥，繼續(xù)加熱。當壓力表上升到所需壓力時（一般為1千克/厘米2），開始計算滅菌時間。此時應(yīng)適當關(guān)小熱源，不斷調(diào)節(jié)熱源大小，使壓力始終維持在所需數(shù)值上，達到保壓時間后，停止加熱，使滅菌鍋內(nèi)壓力自然下降。

　　（3）結(jié)束　待壓力表降至“0”時，擰松螺旋，半開鍋蓋，用鍋內(nèi)余熱烘干蓋紙，10分鐘后取出滅菌物品。

　　（4）注意事項　在滅菌過程中，應(yīng)注意排凈鍋內(nèi)冷空氣，鍋內(nèi)冷空氣如排放不凈，會影響滅菌效果，達不到徹底滅菌的目的。由于高壓蒸汽滅菌時，要使用溫度高達120℃、醫(yī)學教.育網(wǎng)搜集整理兩個大氣壓的過熱蒸汽，操作時，必須嚴格按照操作規(guī)程操作，否則容易發(fā)生意外事故。