微生物檢驗在感染性疾病及相關(guān)病患的預(yù)防、診斷治療中起著越來越重要的作用,為了保障檢驗結(jié)果的準(zhǔn)確性,在日常工作中要注意開展質(zhì)量控制,包括室間質(zhì)量控制和室內(nèi)質(zhì)量控制。室間質(zhì)量控制是各實驗室之間進(jìn)行質(zhì)量控制的一種方式,也是上級實驗室對各實驗室進(jìn)行質(zhì)量管理的手段。室間質(zhì)控是建立在一個較好的室內(nèi)質(zhì)控基礎(chǔ)上的,做好室內(nèi)質(zhì)控直接關(guān)系到日常檢驗工作的質(zhì)量。室內(nèi)質(zhì)控主要包括以下幾個方面:技術(shù)人員的質(zhì)量控制、培養(yǎng)基的質(zhì)量控制、標(biāo)本的質(zhì)量控制、常用儀器設(shè)備的質(zhì)量控制。
1室內(nèi)質(zhì)量控制
1.1檢驗人員的質(zhì)量控制
要求參加檢驗的人員應(yīng)具備一定的理論知識、實際操作和分析判斷能力。應(yīng)積極參加上級部門組織的培訓(xùn),加強理論學(xué)習(xí),不斷提高檢驗水平和處理各種樣品的能力。實驗室應(yīng)統(tǒng)一檢驗方法,按照國家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行操作。制訂各項規(guī)章制度,對各級人員的職責(zé)和權(quán)限做出明確規(guī)定。
1.2培養(yǎng)基的質(zhì)量控制
配置培養(yǎng)基一般質(zhì)量要求:
?。?)培養(yǎng)基應(yīng)有明確標(biāo)記與配制日期醫(yī)學(xué)教|育網(wǎng)搜集整理。液體培養(yǎng)基應(yīng)清澈。含倒管者,倒管內(nèi)應(yīng)液體充盈,無氣泡;固體培養(yǎng)基應(yīng)保持適當(dāng)?shù)挠捕?,接種前無菌落。
?。?)不定期檢查pH值,要求在規(guī)定的pH值±0.2內(nèi)。有指示劑的培養(yǎng)基要保持應(yīng)出現(xiàn)的顏色。
?。?)傾注瓊脂平板的體積一般為15ml,斜面不超過試管的2/3.
?。?)無菌分裝的培養(yǎng)基應(yīng)在培養(yǎng)箱(36℃)過夜,無菌生長才能使用,高壓滅菌培養(yǎng)基應(yīng)隨機抽樣5%~10%作無菌試驗。
?。?)培養(yǎng)基應(yīng)放在適當(dāng)溫度下保存。
?。?)需在有效期內(nèi)使用,使用時觀察培養(yǎng)基是否變質(zhì)。
1.3標(biāo)本檢驗的質(zhì)量控制
標(biāo)本的合格與否是檢驗結(jié)果準(zhǔn)確與否的關(guān)鍵,所以標(biāo)本的正確采集、保存、運送和處理至關(guān)主要。
1.3.1標(biāo)本的采集
?。?)注意選擇采樣的時間,一般選擇疾病的早期、急性期或癥狀典型時或用藥前采集,食物中毒的標(biāo)本應(yīng)及時采集可疑食物等;
(2)注意采集方法,根據(jù)待測微生物種類的不同,采用不同的采樣方法,如需氧菌、厭氧菌或兼性厭氧菌、真菌、L-型細(xì)菌以及其他微生物的檢驗均須用不同的方法采樣;
(3)盛裝標(biāo)本的容器,除大便、肛拭子、咽拭子和痰等標(biāo)本外,其他標(biāo)本均應(yīng)無菌操作采集,并以無菌容器盛裝;
(4)標(biāo)本量,所采集的標(biāo)本應(yīng)具有合理的布點;
?。?)注意安全,標(biāo)本采集時必須采取有效的措施防止污染、傳播和自身感染。
1.3.2標(biāo)本保存和運送
一般樣本應(yīng)就地采集并及時送檢,若現(xiàn)場離實驗室遠(yuǎn),則所采集的樣本必須妥為保存,往往采用適當(dāng)?shù)谋4嬉汉捅4鏃l件(如保溫、冷藏、厭氧或接種人培養(yǎng)基),以避免標(biāo)本腐敗變質(zhì);標(biāo)本運送應(yīng)有專人負(fù)責(zé),特別是烈性傳染病樣本應(yīng)密封,并保證由兩人以最快的交通工具運送,還應(yīng)確保安全。
1.4常用儀器設(shè)備的質(zhì)量控制
?。?)恒溫培養(yǎng)箱要求36±1℃,恒溫水浴箱可調(diào)至56℃±1℃或44℃±1℃、霉菌培養(yǎng)箱25℃±1℃、電冰箱4℃±2℃,低溫冰箱-20℃±5℃,所用儀器應(yīng)恒溫準(zhǔn)確,要每天觀察和記錄溫度的變化。
(2)高壓蒸氣消毒器的質(zhì)量控制主要有生物學(xué)方法及化學(xué)方法。生物學(xué)方法是利用嗜熱脂肪芽孢桿菌對熱的耐受性,把紙片放入高壓蒸氣消毒器內(nèi),滅菌后取出置于溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基中,觀察有無細(xì)菌生長?;瘜W(xué)方法是化學(xué)指示卡檢測方法,將既能指示蒸氣溫度又能指示溫度持續(xù)時間的化學(xué)指示卡放人物品中央,經(jīng)過滅菌后取出指示卡,根據(jù)其顏色及性狀的改變判斷是否達(dá)到滅菌條件。
2室間質(zhì)量控制
由國家級省級市級檢驗指控中心定期或不定期檢查各實驗室的檢測水平,發(fā)給未知樣品,考核實驗室真實的技術(shù)水平和熟練程度??偨Y(jié)分析檢測結(jié)果,促進(jìn)提高檢驗人員理論和檢驗技術(shù)水平。
總之,微生物實驗室的質(zhì)量控制管理,尤其室內(nèi)質(zhì)量控制要做好,主要在于堅持,持之以恒。實驗室制訂了自己的實驗室操作手冊后,就要在日常工作中執(zhí)行,不要松懈,才能充分發(fā)揮出質(zhì)量控制的應(yīng)有作用。