一、分光光度技術的定性方法

　　對待測物質進行定性分析的依據(jù)是最大吸收波長λmax和摩爾吸光系數(shù)ε。

　　1.最大吸收波長λ_max方法

　　將不同波長的光透過待測物溶液測定其吸光度，用波長和吸光度作圖可找出最大吸收峰，其相應的波長為最大吸收波長λ_max，和標準品的λ_max相比較，可對待測物質進行定性分析。

　　2.摩爾消光系數(shù)ε方法

　　準確配制待測物質的溶液，在最大吸收波長處測定其吸光度值，根據(jù)Lambert-Beer定律ε＝A／（L×C），可計算出待測物的ε，和已知ε的標準液相比較，可對待測物質進行定性分析。

　　二、分光光度技術的定量方法

　　1.標準曲線法

　　根據(jù)Lambert-Beer定律，液體的濃度在一定范圍內與吸光度成正比關系。配制一系列濃度的標準品溶液（濃度應包含高、中、低濃度范圍），按標本處理方法作相同處理，在特定波長下測定吸光度，以標準液濃度為橫坐標，以吸光度為縱坐標，按最小二乘法的原理，將對應各點連成一條通過原點的直線，這條直線稱為標準曲線。待測溶液測定吸光度后，從標準曲線上可查出其相應的濃度。

　　制作和應用標準曲線時應注意下面幾點：

　?。?）測定條件發(fā)生變化時（如更換標準品和試劑等），應重新繪制。

　?。?）標準品應有高的純度，標準液的配制應準確。

　?。?）當待測液吸光度超過線性范圍時，應將標本稀釋后再測定。

　?。?）標本測定的條件應和標準曲線制作時的條件完全一致醫(yī)學教育`網(wǎng)搜集整理。

　　2.比較法

　　已知濃度的標準品和標本作同樣處理，使用相同的空白，同時測定標準管和標本的吸光度，根據(jù)測定的吸光度及標準品濃度，可直接計算出標本的濃度，計算公式為：

　　Cu＝（Au×Cs）／As

　　其中Cu和Au為標本管濃度和吸光度，Cs和As分別為標準管濃度和吸光度。用標準品法定量時，標準品的濃度應盡量和標本管濃度相近。

　　3.其它分析方法

　　包括差示法、多組分混合物分析和利用摩爾吸光系數(shù)分析等方法。