【關(guān)鍵詞】 生化檢驗

　　【摘要】 目的 對生化檢驗結(jié)果與臨床不符的探討。 方法 在自動生化分析儀器上，觀察到血清顏色對一部分生化檢驗結(jié)果具有很強(qiáng)的干擾作用。結(jié)果 以甘油三酯為例：血紅蛋白含量1g/L的血清標(biāo)本測得甘油三酯平均值比標(biāo)準(zhǔn)高出0.27mmol/L；總膽紅素含量232mmol/L的血清標(biāo)本測得甘油三酯平均值比標(biāo)準(zhǔn)高出0.28mmol/L.結(jié)論 我們通過改進(jìn)自動生化分析儀的檢測程序，在不影響系統(tǒng)資源的情況下較好地消除了這種干擾。

　　【關(guān)鍵詞】 自動生化分析儀 檢驗結(jié)果 顏色干擾

　　根據(jù)臨床觀察，生化自動分析儀具有分析速度快，結(jié)果重現(xiàn)性好等優(yōu)點(diǎn)。但偶爾也有醫(yī)生反映黃疸病人的檢測結(jié)果與臨床不符，這應(yīng)當(dāng)仔細(xì)分析其原因。

　　眾所周知，在醫(yī)學(xué)檢驗中，血液中的許多化學(xué)物質(zhì)大多是通過在血清中加入不同的化學(xué)試劑使之發(fā)生化學(xué)反應(yīng)產(chǎn)生顏色變化來測定其含量。然而，不同的人體血清標(biāo)本，顏色（如：黃疸、溶血）差異很大，標(biāo)本底色的不同無疑會對檢驗結(jié)果產(chǎn)生影響和干擾。在傳統(tǒng)的手工檢測方法中，這種顏色差異的干擾通常用空白對照予以消除；在一些自動生化分析儀器上，為了節(jié)約系統(tǒng)資源和增加儀器的檢測速度，大多數(shù)化驗項目的檢測程度均沒有高設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)的空白對照管，那么血清顏色對其結(jié)果是否有影響，影響有多大，怎樣才能減小甚至消除這種影響？筆者以檢測甘油三酯為例，做一個簡單的實驗：我們在RA-500自動生化分析儀上用生理鹽水代替試劑對溶血和黃疸標(biāo)本分別進(jìn)行了20次重復(fù)檢測，其結(jié)果血紅蛋白含量1g/L的標(biāo)本測得甘油三酯的平均值為0.27mmol/L；總膽紅素含量232mmol/L的標(biāo)本測得甘油三酯平均值0.28mmol/L.可見血清顏色對RA系列自動生化分析儀檢測甘油三酯有很強(qiáng)的干擾，筆者對其原因進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)其檢測程序為不設(shè)空白對照管的終點(diǎn)法。因為該儀器出廠時設(shè)置的終點(diǎn)法操作程序在加入血清后不能再讀空白，所以血清的顏色被累積入化學(xué)反應(yīng)顏色的“加深”，從而使檢測結(jié)果增高。因此，只要是以這種模式來進(jìn)行試驗操作的生化分析義，血清顏色都會影響它的檢驗結(jié)果。

　　如何消除這種影響？筆者嘗試用雙波長法進(jìn)行補(bǔ)償，但效果不理想；用增設(shè)標(biāo)本空白來消除這種干擾，則使試劑消耗增加一倍，且生化分析儀的檢測速度下降約50%，不利于系統(tǒng)資源的充分利用。為了解決這一問題，筆者對該儀器的操作程序進(jìn)行了認(rèn)真的分析，發(fā)現(xiàn)其一級速率反應(yīng)法的操作程序比較其終點(diǎn)法可增加一次在加樣后15s內(nèi)再讀空白的操作。于是筆者對它的一級速率法檢測模式加以改良后用于甘油三酯做終點(diǎn)檢測，結(jié)果顯示可以有效地排除血清顏色對甘油三酯檢驗結(jié)果的影響。

　　1材料與方法

　　1.1材料 （1）RA-500自動生化分析儀。（2）元生甘油三酯檢測試劑。

　　1.2方法 在自動生化分析儀上設(shè)置一級速率法檢測模式，標(biāo)本3.5μl，試劑350μl，波長500nm，延遲時間15s孵育時間5min，RGT RATE=0；測得終點(diǎn)光密度減空白讀數(shù)即得5min光密度增加值，再根據(jù)同樣方法處理的標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度和光密度即可求得每升血清中甘油三酯的含量。

　　2實驗結(jié)果2.1重復(fù)性試驗 取一份定值1.20mmol/L質(zhì)控血清，按上述方法測定20次經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理，均值為1.19mmol/L，CV=1.22%，OCV符合世界衛(wèi)生組織的規(guī)定。

　　2.2干擾、對照試驗 把溶血標(biāo)本和黃疸標(biāo)本用本法和有標(biāo)本空白對照管的終點(diǎn)法分別進(jìn)行20次檢測對照。兩種方法比較，結(jié)果經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理，P>0.05；數(shù)據(jù)顯示血清中含血紅蛋白（1g/L）或總膽紅素（232mmol/L）對實驗結(jié)果無影響。

　　2.3回收率測定 取已知含量的甘油三酯標(biāo)準(zhǔn)液一份，分別加入不同量的甘油三酯，然后再分別測定其含量，求得高、中、低值平均回收率為98.8%.

　　3討論把一級速率法檢測模式用于終點(diǎn)法檢驗項目，有兩個值得注意的問題：一是由于這些反應(yīng)的濃度與光密度增加的速度線性關(guān)系不夠理想，所以孵育時間應(yīng)足夠長以測得其終點(diǎn)光密度為最好；二是為減少在延遲時間內(nèi)的呈色損失，延遲時間應(yīng)盡可能短，以試劑與標(biāo)本剛好混合均勻為宜。

　　將一級速率法檢測模式用于終點(diǎn)檢測有一定的局限性，它要求呈色反應(yīng)的速度不能太快，以15s左右開始反應(yīng)，5min以內(nèi)達(dá)到終點(diǎn)為最好。

　　我們將上述方法用于日常工作，兩年多來，這一項目的檢驗結(jié)果均與臨床相符合，醫(yī)生反映良好。

　　可以參考我們的方法對其他分析儀器進(jìn)行血清顏色的干擾試驗，如果有干擾，可以采取上述方法或其他的應(yīng)對措施使檢驗結(jié)果更加準(zhǔn)確，更好地為臨床服務(wù)，有興趣的同行值得一試。