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凝集反應(yīng)

2011-01-17 11:03 來源:
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  指顆粒性抗原(細(xì)菌、細(xì)胞等)與相應(yīng)的抗體,或可溶性抗原(亦可用抗體)吸附于與免疫無關(guān)的載體形成致敏顆粒(免疫微球)與相應(yīng)的抗體(或抗原),在有適量電解質(zhì)存在下,形成肉眼可見的凝集小塊。

  1.直接凝集反應(yīng)(direct agglutination) 是顆粒性抗原又稱凝集原與相應(yīng)抗體直接結(jié)合所呈現(xiàn)的凝集現(xiàn)象,如紅細(xì)胞和細(xì)菌凝集試驗。主要有玻片法、試管法及微量凝集法。玻片法為定性試驗,方法簡便快速,常用已知抗體檢測未知抗原,應(yīng)用于菌種鑒定,分型及人紅細(xì)胞ABO血型測定等;試管法通常為半定量試驗,常用已知抗原檢測待檢血清中有無相應(yīng)抗體及其相對含量,以幫助臨床診斷和分析病情。例如臨床實驗室常用的診斷傷寒或副傷寒的肥達(dá)氏試驗(Widal test);診斷布魯氏菌病的瑞特氏實驗(Wrig test)及診斷斑疹傷寒及恙蟲病的外裴二氏試驗(Weil felix test)等。

  2.間接凝集反應(yīng)(indirect passive agglutination) 是可溶性抗原或抗體吸附于與免疫無關(guān)的微球載體上,形成致敏載體(免疫微球),與相應(yīng)的抗體或抗原在電解質(zhì)存在的條件下進行反應(yīng),產(chǎn)生凝集,稱為間接凝集或被動凝集;實驗室常用的載體微球有人O型血紅細(xì)胞、綿羊或家兔紅細(xì)胞、聚苯乙烯乳膠、活性炭等,根據(jù)應(yīng)用的載體種類不同,分別稱為間接血凝、間接乳膠凝集及間接炭凝試驗等。本試驗主要用于某些傳染病如鉤端螺旋體抗原和原發(fā)性肝癌的早期診斷。間接凝集反應(yīng)擴大了凝集反應(yīng)的應(yīng)用范圍,其發(fā)展取決于載體,修飾載體使其帶有化學(xué)活性基團,或選用吸附力強、穩(wěn)定性高和帶有色素的載體,必將演化出新的方法。

  3.間接凝集抑制試驗(indirect agglutination inhibition test) 將可溶性抗原與相應(yīng)抗體預(yù)先混合并充分作用后,再加入抗原致敏的載體,此時因抗體已被可溶性抗原結(jié)合,阻斷了抗體與致敏載體上的抗原結(jié)合,不再出現(xiàn)凝集現(xiàn)象,稱為間接凝集抑制試驗。臨床常用的免疫妊娠試驗(immune pregnancy test)即屬此類。若以紅細(xì)胞作為載體則稱為間接血凝抑制試驗。

  所有上述凝集試驗均可劃分為正向和反向凝集試驗,以已知抗原測抗體的凝集試驗為正向凝集試驗,通常“正向”兩字省略,反之,為反向凝集試驗。

  4.協(xié)同凝集試驗(co-agglutination) 以金黃色葡萄球菌為載體,利用其細(xì)胞壁中的A蛋白(SPA)具有結(jié)合人及多種哺乳動物IgG Fc段的特性。將特異性抗體結(jié)合至金黃色葡萄球菌菌體,其Fab段暴露于菌體表面,遇到相應(yīng)抗原時與之結(jié)合,即可導(dǎo)致金黃色葡萄球菌凝集(圖18.2)。稱為協(xié)同凝集試驗。常用于早期診斷流腦、傷寒、菌痢及布魯氏菌病。

  5.抗人球蛋白試驗(anti-human globulin reaction) 機體受抗原刺激后,除可產(chǎn)生完全抗體外,在某些病人(先天性溶血性貧血)也可產(chǎn)生不完全抗體(IgG),后者雖能與抗原結(jié)合,但不出現(xiàn)肉眼可見反應(yīng)現(xiàn)象。Coomb等把含有不完全抗體血清球蛋白注射到異種動物體內(nèi),使其產(chǎn)生抗人球蛋白抗體,將該抗人球蛋白抗體加入到顆粒性抗原與相應(yīng)的不完全抗體復(fù)合物中,就能出現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象,稱為抗人球蛋白試驗,又稱Coomb's試驗。主要用于檢測Rh抗體及布魯氏菌抗體。

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