電阻抗法血細(xì)胞計(jì)數(shù)原理又名庫(kù)爾特原理。
1.紅細(xì)胞檢測(cè)原理:將等滲電解質(zhì)溶液稀釋的細(xì)胞懸液置入不導(dǎo)電的容器中,將小孔管(也稱(chēng)傳感器)插進(jìn)細(xì)胞懸液中。小孔管內(nèi)充滿電解質(zhì)溶液,并有一個(gè)內(nèi)電極,小孔管的外側(cè)細(xì)胞懸液中有一個(gè)外電極。當(dāng)接通電源后,位于小孔管兩側(cè)電極產(chǎn)生穩(wěn)定電流,稀釋細(xì)胞懸液從小孔管外側(cè)通過(guò)小孔管壁上寶石小孔(直徑<100μm,厚度約75μm)向小孔管內(nèi)部流動(dòng),使小孔感應(yīng)區(qū)內(nèi)電阻增高,引起瞬間電壓變化形成脈沖信號(hào),脈沖振幅越高,細(xì)胞體積越大,脈沖數(shù)量越多,細(xì)胞數(shù)量越多,由此得出血液中血細(xì)胞數(shù)量和體積值。
電阻抗原理示意圖
三分類(lèi)血球分析儀工作原理示意圖
2.白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)原理
根據(jù)電阻抗法原理,經(jīng)溶血?jiǎng)┨幚淼?、脫水的、不同體積的白細(xì)胞通過(guò)小孔時(shí),脈沖大小不同,將體積為35~450fl白細(xì)胞,分為256個(gè)通道,其中,淋巴細(xì)胞為單個(gè)核細(xì)胞、顆粒少、細(xì)胞小,位于35~90fl的小細(xì)胞區(qū),粒細(xì)胞(中性粒細(xì)胞)的核分多葉、顆粒多、胞體大,位于160fl以上的大細(xì)胞區(qū),單核細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞、原始細(xì)胞、幼稚細(xì)胞等,位于90~160fl的單個(gè)核細(xì)胞區(qū),又稱(chēng)為中間型細(xì)胞。儀器根據(jù)各亞群占總體的比例,計(jì)算出各亞群細(xì)胞的百分率,醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)整理并同時(shí)計(jì)算各亞群細(xì)胞的絕對(duì)值,顯示白細(xì)胞體積分布直方圖。
3.血紅蛋白測(cè)定原理
當(dāng)稀釋血液中加入溶血?jiǎng)┖?,紅細(xì)胞溶解并釋放出血紅蛋白,血紅蛋白與溶血?jiǎng)┲械哪承┏煞纸Y(jié)合形成一種血紅蛋白衍生物,在特定波長(zhǎng)(530~550nm)下比色,吸光度變化與稀釋液中Hb含量成正比,最終顯示Hb濃度。不同類(lèi)型血液分析儀,溶血?jiǎng)┡浞讲煌?,所形成血紅蛋白衍生物不同,吸收光譜不同,如含氰化鉀的溶血?jiǎng)c血紅蛋白醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)整理作用后形成氰化血紅蛋白,其最大吸收峰接近540nm。