［方法學(xué)評(píng)價(jià)］ 隱血試驗(yàn)（occultblood test，OBT）目前主要采用化學(xué)法。如鄰聯(lián)甲苯胺法、還原酚酞法、聯(lián)苯胺法、匹拉米洞法，無(wú)色孔雀綠法、愈創(chuàng)木酯法等。其實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)原理基本于血紅蛋白中的含鐵血紅素部分有催化過(guò)氧化物分解的作用，能催化試劑中的過(guò)氧化氫，分解釋放新生態(tài)氧，氧化上述色原物質(zhì)而呈色。呈色的深淺反映了血紅蛋白多少，亦即出血量的大小。經(jīng)上試驗(yàn)方法雖然原理相同，但在實(shí)際應(yīng)用中卻由于糞便的成分判別很大，各實(shí)驗(yàn)室具體操作細(xì)節(jié)如糞便取材多少，試劑配方、觀察時(shí)間等不同，而使結(jié)果存在較在差異。醫(yī)學(xué)教|育網(wǎng)搜集整理多數(shù)方獻(xiàn)應(yīng)用稀釋度的血紅蛋白液對(duì)這些方法靈敏度的研究表明，鄰苯甲苯胺法、鄰甲苯胺法、還原酚酞法最靈敏，可檢測(cè)出0.2-1mg/L的血紅蛋白，只要消化道有1-5ml的出血就可檢出。還原酚酞法由于試劑極不穩(wěn)定，放置可自發(fā)氧化變紅而被摒棄。高度靈敏的鄰聯(lián)甲苯胺法常容易出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果，中度靈敏的試驗(yàn)包括聯(lián)苯胺法、無(wú)色孔雀綠法，可檢出1-5mg/L的血紅蛋白，消化道有5-10ml出血即為陽(yáng)性。聯(lián)苯胺法由于有致癌作用而無(wú)色孔雀綠法在未加入異喹啉時(shí)靈敏度差，需（20mg/L血紅蛋白，）試劑配制和來(lái)源均不如拉米洞方法方便。愈創(chuàng)木酯法靈敏度關(guān)，需6-10ml/L血紅蛋白才能檢出，此時(shí)消化道出血可達(dá)20ml但假陽(yáng)性很少，如此法為陽(yáng)性，基本可確診消化道出血。目前國(guó)內(nèi)外生產(chǎn)應(yīng)用四甲基礎(chǔ)聯(lián)苯胺和愈創(chuàng)木酯為顯色基質(zhì)的隱血試帶，使隱血試驗(yàn)更為方便，但未要么本解決隱血試驗(yàn)方法的學(xué)中的問(wèn)題。

以上各種隱血試驗(yàn)化學(xué)法雖簡(jiǎn)單易行，但均基于血紅蛋白中的血紅素可促使又氧水分解釋放新生態(tài)氧，使色原物質(zhì)氧化這一原理，方法上缺乏特異準(zhǔn)確性。此外化學(xué)試劑不穩(wěn)定，久置后可使反應(yīng)減弱。外源性動(dòng)物儀器如含有血紅蛋白，肌紅蛋白、其血紅素的作用均可使試驗(yàn)呈陽(yáng)性，大量生食蔬菜中含有活性的植物過(guò)氧化物酶也可催化雙氧水分解，出現(xiàn)假陽(yáng)性反應(yīng)，所以除愈創(chuàng)木酯法外均要求素食3天，為此有人提出將糞便用水作1：3稀釋加熱煮沸再加冰乙酸和乙醚提取血紅蛋白測(cè)定可排除干擾。此法雖然可靠，但不適用于常規(guī)工作。加外血液如在腸道停留過(guò)久，血紅蛋白被細(xì)菌降解，血紅素不復(fù)存在，則會(huì)出現(xiàn)與病情不符的陰性結(jié)果，病人服用大量維生素C劃其它具有還原作用的藥物，以實(shí)驗(yàn)中可使過(guò)氧化物還原，不能再氧化色原物質(zhì)，亦可使隱血試驗(yàn)呈假陰性。除上樁干擾隱血試驗(yàn)亦可由于檢驗(yàn)人員取材部位不同，標(biāo)本反應(yīng)時(shí)間不同，檢驗(yàn)員對(duì)顯色判斷不同，故在不同一方法的試驗(yàn)中，還可產(chǎn)生誤差等，致使目前國(guó)內(nèi)外尚無(wú)統(tǒng)一公認(rèn)的推薦的方法，更談不到實(shí)驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)化。

為解決隱血試驗(yàn)的特異性問(wèn)題及鑒別消化道出血部位，當(dāng)前發(fā)展的最快的是免疫學(xué)方法，如免疫單擴(kuò)法、對(duì)泫免疫電泳、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、免疫斑點(diǎn)法、膠乳免疫化學(xué)凝聚淪，放射免疫擴(kuò)散法、反向間接血凝法、膠體金標(biāo)記夾心免疫檢驗(yàn)法等，此類(lèi)試驗(yàn)所用抗體分為兩大類(lèi)，一種為抗人血紅蛋白抗體，加一種抗人紅細(xì)胞基質(zhì)抗體。免疫學(xué)方法具有很好的靈敏度，一般血紅蛋白為0.2mg/L，0.03mg/g糞便就可得到陽(yáng)性結(jié)果，且有很高的特異性，各種動(dòng)物血血紅蛋白在500mg/L辣根過(guò)氧化物酶在2000mg/L時(shí)不會(huì)出現(xiàn)干擾，因而不需控制飲食，據(jù)Herzog和Cameron等研究，正常人24小時(shí)胃腸道生理性失血量為0.6ml，若每日在于2ml，則屬于病理性出血。由于免疫學(xué)方法的高度敏感性，又由于有正常的生理性失血，如此高的靈敏度，要在某些正常人特別是服用刺激備用腸道藥物后可造成假陽(yáng)性。但免疫學(xué)支隱血試驗(yàn)主要檢測(cè)下消化道的優(yōu)點(diǎn)，目前被認(rèn)為是對(duì)大腸癌普查最適用的試驗(yàn)，免疫學(xué)法隱血試驗(yàn)主要檢測(cè)下消化道出血，約有40-50%的上消化道出血不能檢出。原因是：①血紅蛋白或紅細(xì)胞經(jīng)過(guò)消化酶降解就業(yè)性或消化殆盡已不具有原來(lái)免疫原性；②過(guò)量大出血而致反應(yīng)體系中抗原過(guò)剩出現(xiàn)前帶現(xiàn)象；③病人血紅蛋白的抗原與單克隆抗體不配，因此有時(shí)外觀為柏油樣便而免疫法檢查卻呈陰性或弱陽(yáng)性，此進(jìn)需將原已稀釋的糞便再稀釋50-100倍重做或用化學(xué)法復(fù)，檢。近年來(lái)某些實(shí)驗(yàn)室還采用卟啉熒光法血紅蛋白定量試驗(yàn)，用縶草酸試劑使血紅素變?yōu)檫策M(jìn)行熒光檢測(cè)，這樣除可測(cè)糞澡未降解的血紅蛋白外，還可測(cè)血紅素衍化物卟啉，從而克服了化學(xué)法和免疫法受血紅蛋白降解影響缺點(diǎn)，可對(duì)上、下消化道出血同樣敏感，但外源性血紅素、卟啉類(lèi)物質(zhì)具有干擾性，且方法較復(fù)雜，故不易推廣使用。此外免疫學(xué)的方法也從檢測(cè)血紅蛋白與人紅細(xì)胞基質(zhì)擴(kuò)展到測(cè)定糞便中其它隨出血而出現(xiàn)的帶有良好的抗原性而又不易迅速降的蛋白質(zhì)、如白蛋白、轉(zhuǎn)鐵蛋白等，靈敏度達(dá)2mg/L.

［臨床意義］ 糞便隱血檢查對(duì)消化道出血的診斷有重要價(jià)值。消化性潰瘍、藥物致胃粘膜損傷（如服用消炎痛、糖皮質(zhì)激素等）、腸結(jié)核、克羅恩病、潰瘍性結(jié)腸炎、結(jié)腸息肉、鉤蟲(chóng)病及胃癌、結(jié)腸癌等消化腫瘤時(shí)，糞便隱知試驗(yàn)均常為陽(yáng)性，故須結(jié)合臨床其它資料進(jìn)行鑒別診斷在消化性潰瘍時(shí)，陽(yáng)性率為40-70%，呈間斷性陽(yáng)性。消化性潰瘍治療后當(dāng)糞便外觀正常時(shí)，隱血試驗(yàn)陽(yáng)性仍可持續(xù)5-7天，此后如出血完全停止，隱血試驗(yàn)即可轉(zhuǎn)陰。消化道癌癥時(shí)，陽(yáng)性率可達(dá)95%.呈持續(xù)性陽(yáng)性，故糞便隱血試驗(yàn)常作為消化道惡性腫瘤診斷的一個(gè)篩選指標(biāo)。尤其對(duì)中老年人早期發(fā)現(xiàn)消化道惡性腫瘤有重要價(jià)值。此外在流行性出血熱患者的糞便中隱血試驗(yàn)也有84%的陽(yáng)性率，可作為該病的重要的佐證。