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埃希菌屬的微生物學檢查

2013-08-10 09:09 來源:
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埃希菌屬的微生物學檢查是醫(yī)學檢驗技士考試考點,醫(yī)學教育網(wǎng)整理如下,供考生分享。

1、標本采集

腸道感染可采集糞便;腸外感染可根據(jù)臨床感染情況采集標本,除血液標本外,均需作涂片染色檢查。膿、痰、分泌物可直接涂片,革蘭染色后鏡檢。尿液和其它液體先低速離心,再取沉淀物作涂片。

2、檢驗方法及鑒定

(1)涂片與鏡檢:膿汁及增菌培養(yǎng)物發(fā)現(xiàn)單一革蘭陰性桿菌,可初步報告,染色、形態(tài)、性狀供臨床用藥參考。

(2)分離培養(yǎng):糞便標本可用弱選擇鑒別培養(yǎng)基進行分離,膿汁等可用血平板分離,取可疑菌落進行形態(tài)觀察及生化反應。

(3)鑒定:

1)初步鑒定:根據(jù)菌落特征,涂片染色的菌形及染色反應,取純培養(yǎng)物作生化反應。

凡符合KIA(克氏雙糖):A/A或K/A(A是產(chǎn)酸,K是產(chǎn)堿),產(chǎn)氣或不產(chǎn)氣,H2S(陰性),尿素(MIU):動力+或~、吲哚+、脲酶~,甲基紅+,硝酸鹽還原+,VP~,氧化酶~,枸櫞酸鹽~,可鑒定為大腸埃細菌。

2)最后鑒定:一般常規(guī)檢驗做到上述初步鑒定即可,必要時可做系列生化反應最后鑒定。其中主要的鑒定試驗為:氧化酶陰性、發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣或只產(chǎn)酸、發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣或遲緩發(fā)酵產(chǎn)酸、不發(fā)酵肌醇、IMViC反應為++——、脲酶陰性、H2S陰性、苯丙氨酸脫氫酶陰性、硝酸鹽還原陽性、動力多數(shù)陽性。

3)某些大腸埃細菌,尤其是無動力的不發(fā)酵乳糖株,應與志賀菌相鑒別,兩者的主要鑒別試驗可用醋酸鈉和葡萄糖銨利用試驗及粘質(zhì)酸鹽產(chǎn)酸三種試驗。大腸埃希菌均為陽性,而志賀菌均為陰性。

腸道外感染,經(jīng)涂片染色,分離培養(yǎng)后,生化鑒定到種;由于大腸埃希菌是超廣譜β~內(nèi)酰胺酶的主要產(chǎn)酶株,該酶由質(zhì)粒介導。應對β~內(nèi)酰胺酶產(chǎn)菌株進行確定,根據(jù)藥敏試驗結(jié)果選用有活性的抗生素進行治療。

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