臨床酶學(xué)標(biāo)準(zhǔn)化的新途是生化檢驗(yàn)考試復(fù)習(xí)需要了解的知識，醫(yī)學(xué)|教育網(wǎng)搜集整理了相關(guān)內(nèi)容與考生分享。

在臨床上，測定血清或其他組織中一些酶的水平對很多疾病的診斷、預(yù)防及判定病情的進(jìn)展具有重要意義。酶的測定可利用生化學(xué)的方法測定酶的催化活性和將酶作為蛋白用免疫方法測定酶的質(zhì)量。測定酶的催化活性是最為常用方法，它具有迅速、靈敏、成本低等特點(diǎn)。是目前臨床上測定酶水平廣泛使用的常規(guī)方法。但這種方法也存在著不足，作者擬就臨床酶學(xué)測定中存在的問題及目前國際上解決問題的途徑結(jié)合我們的一些調(diào)查結(jié)果做一闡述。

一、 測定酶催化活性存在的問題

測定酶的催化活性雖然是臨床上最常用的方法，但由于酶的催化活性不僅決定于酶的含量，還受多種因素的影響，如所用底物的性質(zhì)及濃度、反應(yīng)介質(zhì)的PH、溫度、離子強(qiáng)度、激活或抑制因子等，因此具有方法依賴性。這是測定酶的催化活性存在的主要問題所在。因此對同一酶項(xiàng)目存在多種參考范圍，各實(shí)驗(yàn)室間的結(jié)果缺乏可比性，室間質(zhì)評用樣本的靶值難以確定，甚至有時(shí)會(huì)引起臨床上的誤診。國內(nèi)各臨床實(shí)驗(yàn)室間測定，酶活性結(jié)果的差異較大，明顯高于一般項(xiàng)目的測定結(jié)果。

二、 解決酶活性測定方法依賴性的途徑

對酶活性測定進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化是解決這一問題的最好方法。早在20余年前國際上就開始了這方面的工作。當(dāng)時(shí)提出的標(biāo)準(zhǔn)化途徑推薦使用統(tǒng)一的測定方法，一些學(xué)術(shù)團(tuán)體推出了臨床常用酶催化活性測定的推薦方法和參考方法。如國際臨床化學(xué)聯(lián)合會(huì)（IFCC）酶專家組已經(jīng)完成了r-谷氨?；D(zhuǎn)移酶（GGT）（1983年）、堿性磷酸酶（ALP）（1983年）、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）（1986年）、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）（1986年）、肌酸激酶（CK）（1991年）、乳酸脫氫酶（LD）（1994年）及a-淀粉酶（a-AMS）（1998年）等的推薦方法。經(jīng)過多年的努力，成功地提高了酶測定的質(zhì)量和可比性。但效果仍不能令人滿意，還存在一些較嚴(yán)重的問題：第一，很多學(xué)術(shù)團(tuán)體提出的推薦方法，即使原理相同，但試劑配方（緩沖液、底物、添加劑等）、反應(yīng)溫度等也可能不同，因此不同推薦方法間缺乏一致性；第二，推薦方法無法跟上分析方法和分析技術(shù)上的進(jìn)步；第三，它不適應(yīng)自動(dòng)化分析儀器。

最近國際上提出了酶活性的測定標(biāo)準(zhǔn)化新途徑，就是使用公認(rèn)的酶校準(zhǔn)物使不同的常規(guī)方法的測定結(jié)果得到統(tǒng)一。目前這項(xiàng)研究已取得了一定的進(jìn)展。IFCC臨床酶學(xué)校準(zhǔn)物工作組（IFCCWG-CCE）于1997年8月和1998年3月分別在瑞士和西班牙召開了工作組會(huì)議，作者作為工作組成員出席了會(huì)議并參與了有關(guān)文件的制定，部分內(nèi)容作為IFCC的文件將會(huì)很快發(fā)表。

三、 酶校準(zhǔn)物的使用方法

使用酶校準(zhǔn)物的方法就是用公認(rèn)的酶校準(zhǔn)物使一種或多種常規(guī)方法測定的結(jié)果與標(biāo)準(zhǔn)方法相同，也就是通過酶校準(zhǔn)物將不同方法得出的結(jié)果的數(shù)值按標(biāo)準(zhǔn)物測定值所選定上午標(biāo)準(zhǔn)方法來表達(dá)。它是利用標(biāo)準(zhǔn)物作為載體，使測定結(jié)果的數(shù)值在標(biāo)準(zhǔn)方法和常規(guī)方法間傳遞。這樣的話，使用標(biāo)準(zhǔn)的校準(zhǔn)物，就有可能統(tǒng)一測定結(jié)果。

法國的Ferard教授（IFCC WG-CCE主席）幾年前就組織了5個(gè)法國實(shí)驗(yàn)室對各實(shí)驗(yàn)室常規(guī)患者血清樣本中的a-AMS、ALP、GGT等3種酶活性分別在校準(zhǔn)前后進(jìn)行了測定。每種酶有兩個(gè)實(shí)驗(yàn)室參加研究，均使用相同的試劑盒在自動(dòng)生化分析儀上進(jìn)行測定。各實(shí)驗(yàn)室均使用統(tǒng)一的校準(zhǔn)物即由歐洲標(biāo)準(zhǔn)局（BCR）提供的酶活性有證參考物（CRM318、CRM319、CRM371）進(jìn)行校準(zhǔn)。通過使用統(tǒng)一的酶校準(zhǔn)物進(jìn)行校準(zhǔn)后，可使在不同溫度下（30℃、37℃）、使用不同緩沖液（ALP測定）、不同底物（a-AMS、GGT測定）或不同底物濃度（GGT測定）的試劑盒測定結(jié)果相對集中。