一、實驗?zāi)康?
⑴了解牛奶酸度和鈣含量的檢測方法及其表示。
⑵了解配位滴定法的原理及方法。
二、實驗內(nèi)容
1.酸度的測定
⑴實驗原理
通過測定牛奶的酸度即可確定牛乳的新鮮程度,同時可反映出乳質(zhì)的實際狀況。
乳的酸度一般以中和100mL牛乳0.1mol·L-1氫氧化鈉溶液的毫升數(shù)來表示,正常牛乳的酸度隨乳牛的品種、飼料、泌乳期的不同而略有差異,但一般均在14~18°T之間。如果牛乳放置時間過長,因細菌繁殖而致使牛乳酸度降低。因此牛乳的酸度是反映乳質(zhì)量的一項重要指標。
⑵試劑及儀器
試劑:1%酚酞指示劑,0.1mol·L-1氫氧化鈉標準溶液,pH=6.88標準緩沖溶液。
儀器:量筒、錐形瓶、堿式滴定管、pHS-25型酸度計。
⑶測定方法
①滴定法
量取50mL鮮乳,注入250mL錐形瓶中,用50mL中性蒸餾水稀釋,加入1%酚酞指示劑5滴,混勻。用0.1mol·L-1氫氧化鈉標準溶液(如何標定?)滴定,不斷搖動,直至微紅色在1min內(nèi)不消失為止。計算酸度以100mL牛乳消耗的NaOH克數(shù)表示,或量取250mL酸牛乳,充分攪拌均勻,然后準確稱取此酸牛乳15~20g于250mL錐形瓶中,加入50mL熱至40℃的蒸餾水(搖勻),加0.1%酚酞指示劑3滴,用0.1mol·L-1NaOH標準溶液滴至微紅色在30s內(nèi)不消失,即為終點,重復(fù)三次,計算酸度(以100g酸牛奶消耗的NaOH的克數(shù)表示)。
②酸度計法
按照pH計的使用說明用標準緩沖溶液pH=6.88定位,用蒸餾水洗凈電極,擦干。取50mL鮮牛奶放入100mL燒杯中,在酸度計上測定pH值。
2.鈣含量的測定
⑴實驗原理
測定牛奶中的鈣采取配位滴定法,用二乙胺四乙酸二鈉鹽(EDTA)溶液滴定牛奶中的鈣。用EDTA測定鈣,一般在pH=12~13的堿性溶液中,以鈣試劑(絡(luò)藍黑R)為指示劑,計量點前鈣與鈣試劑形成粉紅配合物,當用EDTA溶液滴定至計量點時,游離出指示劑,溶液呈現(xiàn)藍色。
滴定時Fe、Al干擾時用三乙醇胺掩蔽。
⑵試劑及儀器
試劑:EDTA標準溶液(0.02mol·L-1)、NaOH(20%)、鉻藍黑R(0.5%)或MgY-EBT作指示劑。
儀器:移液管(25mL)、錐形瓶(250mL)、滴定管。
⑶實驗步驟
⑴EDTA溶液的標定(用標準鋅溶液標定)
⑵鈣含量的測定
準確移取牛奶試樣25.00mL三份分別加入250mL錐形瓶中,加入蒸餾水25mL,加入2mL20%NaOH溶液,搖勻、再加入10~15滴鉻藍黑R指示劑,用標準EDTA滴定至溶液由粉紅色至明顯灰藍色,即為終點,平行測定三次,計算牛奶中的含鈣量,以每100mL牛奶含鈣的毫克數(shù)表示。將純鮮牛奶換成高鈣牛奶,重復(fù)做三次,計算高鈣牛奶中的含鈣量。