凋亡細(xì)胞DNA片斷原位末端檢測(cè)技術(shù)是指在細(xì)胞(或組織)結(jié)構(gòu)保持不變的情況下,用熒光素、地高辛或生物素標(biāo)記的脫氧尿三磷酸(DUTP)和末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶(TdT)相反應(yīng)與凋亡細(xì)胞裂解后3的羥基(-OH)端結(jié)合,經(jīng)顯色反應(yīng)后檢測(cè)DNA裂解點(diǎn)的技術(shù)。
DNA片段原位標(biāo)記法有二種:
1、原位缺口轉(zhuǎn)移(ISNT)技術(shù),它是利用DNA多聚酶I將標(biāo)記的核苷酸連接到斷裂DNA的3-OH端。
2、原位缺口末端標(biāo)記技術(shù)(ISEL),即TUNEL法,它是利用TdT將標(biāo)記的DUPT接到3-OH端。研究證明,TUNEL法的敏感性遠(yuǎn)高于ISNT,尤其對(duì)早期凋亡的檢測(cè),TUNEL為合適。