皮膚試驗的準(zhǔn)備及方法:
皮膚試驗(skintest)簡稱皮試,是在皮膚的體內(nèi)免疫學(xué)試驗醫(yī)學(xué)教|育網(wǎng)搜集整理。當(dāng)試驗抗原進(jìn)入致敏者皮膚時,皮膚中結(jié)合有IgE的肥大細(xì)胞或致敏T細(xì)胞就會與試驗抗原結(jié)合,引發(fā)即刻型或遲發(fā)型的皮膚超敏反應(yīng)。試驗抗原也可從注射部位進(jìn)入微血管,與循環(huán)中的相應(yīng)抗體結(jié)合,形成的免疫復(fù)合物可在局部沉積,激活補體引起炎癥。所以皮膚試驗主要用于檢測型和型變態(tài)反應(yīng),有時也用于檢測Ⅲ型變態(tài)反應(yīng)。
一、試驗準(zhǔn)備
首先應(yīng)當(dāng)制備試驗用抗原,如有合格商品可直接購買。可以作為變應(yīng)原的物質(zhì)種類繁多,例如動物皮毛、家禽羽毛、鴿糞、昆蟲、螨類、真菌、花粉、雜草、物理粉塵和各種食品等都可能成為變應(yīng)原。
不同抗原的制備方法不同,但一般包括以下幾個步驟:
①收集原料;
②粉碎與勻漿;
③脫脂與提?。?/p>
④過濾與分離;
⑤分裝保存。分裝保存之前應(yīng)對提取產(chǎn)物進(jìn)行鑒定。首先必須經(jīng)過無菌試驗、急性毒性試驗和熱原檢查,保證提取產(chǎn)物無明顯的毒副作用;還要測定產(chǎn)物的蛋白含量,用凱氏定氮法或磷鎢酸沉淀法標(biāo)定出總氮單位或蛋白氮單位。
變應(yīng)原的范圍很廣,難以做得完全,所以查找變應(yīng)原需依靠患者的病史和醫(yī)師的經(jīng)驗以將可疑范圍縮小,學(xué)樣成功的機會就大得多。一般醫(yī)院和衛(wèi)生所都能做藥物過敏試驗,多在注射室完成;防疫部位在一些免疫接種之前有時也要做皮膚試敏;其余的均在變態(tài)反應(yīng)科或檢驗科的專門實驗室。實驗室應(yīng)有專人負(fù)責(zé),除具備各種專用試驗器材之外,還應(yīng)備有意外搶救的藥品及設(shè)施。
試驗部位應(yīng)清洗干凈,嚴(yán)格消毒,以免皮膚的不潔物引起非特異性反應(yīng)或感染。當(dāng)皮膚患濕疹、感染、皮炎或外傷時不宜進(jìn)行皮膚試驗。正在或近日服用免疫抑制劑或抗組胺藥物者也不宜進(jìn)行皮膚試驗。
二、試驗類型及方法
皮膚試驗的最常用部位是前臂曲側(cè),因此處皮膚較為光滑細(xì)膩,而且便于試驗操作和結(jié)果觀察。按正規(guī)作法,左右兩臂一側(cè)作試驗,另一側(cè)作對照。需要時也可選用上臂或背部皮膚。具體試驗方法可分為皮內(nèi)試驗、挑刺試驗和斑貼試驗。
皮內(nèi)試驗將試驗抗原與對照液各0.0~20.03ml用皮試針頭分別注入皮內(nèi)(不是皮下),使局部產(chǎn)生一個圓形小丘。當(dāng)同時試驗多種抗原時,相互間至少間隔4cm,以免強烈反應(yīng)時互相混淆結(jié)果。
皮內(nèi)試驗的敏感性比其他皮膚試驗高,所用抗原應(yīng)適當(dāng)稀釋,以免出現(xiàn)嚴(yán)重反應(yīng);當(dāng)高可疑性抗原出現(xiàn)陰性結(jié)果時,應(yīng)逐漸加大抗原濃度進(jìn)行重復(fù)試驗。
皮內(nèi)試驗是最常用的皮膚試驗,應(yīng)用范圍也很廣,幾乎各類抗原及各型反應(yīng)都可用皮內(nèi)試驗進(jìn)行測定,只是不同類型的反應(yīng)觀察結(jié)果的時間和判定結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)不所不同。