珠蛋白合成異常的檢驗(yàn)如何進(jìn)行呢？快來(lái)跟著小編了解一下吧！

（1）血紅蛋白的結(jié)構(gòu)與功能

1）血紅素　血紅素是Hb、肌紅蛋白、多種酶（如過(guò)氧化氫酶）和多種細(xì)胞色素的輔基，其合成的場(chǎng)所主要在骨髓內(nèi)的幼紅細(xì)胞和肝細(xì)胞線粒體。與臨床有關(guān)的是尿卟啉、糞卟啉和原卟啉，當(dāng)卟啉代謝障礙時(shí)，血紅素合成不全，并可能產(chǎn)生卟啉病。

2）珠蛋白　人類的珠蛋白肽鏈有α、β、γ、δ、ε、ζ鏈；這些肽鏈按四級(jí)結(jié)構(gòu)形成Hb。

3）血紅蛋白的功能　運(yùn)輸O2和CO2。

4）生理性血紅蛋白　幾種正常生理性血紅蛋白在胎兒時(shí)期和出生后有明顯的不同。新生兒期內(nèi)HbF（α2γ2）仍高，以后2～4個(gè)月漸下降，1歲左右接近成人水平。成人血紅蛋白HbA（α2β2）出生后逐漸增多，占95%～97%，HbA2（α2δ2）出生后占1.2%～3.5%。

（2）血紅蛋白異常的檢驗(yàn)

1）血紅蛋白電泳

原理：根據(jù)不同的血紅蛋白帶有不同的電荷，等電點(diǎn)不同，在一定的pH緩沖液中，緩沖液的pH大于Hb的等電點(diǎn)時(shí)其帶負(fù)電荷，電泳時(shí)在電場(chǎng)中向陽(yáng)極泳動(dòng)，反之，Hb帶正電荷向陰極泳動(dòng)。經(jīng)一定電壓和時(shí)間的電泳，不同的血紅蛋白所帶電荷不同、相對(duì)分子質(zhì)量不同，其泳動(dòng)方向和速度不同，可分離出各自的區(qū)帶，同時(shí)對(duì)電泳出的各區(qū)帶進(jìn)行電泳掃描，可進(jìn)行各種血紅蛋白的定量分析。

參考值：

pH8.6TEB緩沖液醋酸纖維膜電泳，正常血紅蛋白電泳區(qū)帶：HbA＞95%、HbF＜2%、HbA2為1.0%～3.1%。pH8.6TEB緩沖液適合于檢出HbA、HbA2、HbS、HbC，但HbF不易與HbA分開(kāi)，HbH與HbBarts不能分開(kāi)和顯示，應(yīng)再選擇其他緩沖液進(jìn)行電泳分離。

pH6.5TEB緩沖液醋酸纖維膜電泳，主要用于HbH和HbBarts的檢出。HbH等電點(diǎn)為5.6，在pH6.5TEB緩沖液中電泳時(shí)泳向陽(yáng)極，HbBarts則在點(diǎn)樣點(diǎn)不動(dòng)，而其余的血紅蛋白都向陰極移動(dòng)。

臨床意義

通過(guò)與正常人的血紅蛋白電泳圖譜進(jìn)行比較，可發(fā)現(xiàn)異常血紅蛋白區(qū)帶，如HbH、HbE、HbBarts、HbS、HbD和HbC等。

HbA2增多，見(jiàn)于β珠蛋白合成障礙性貧血，為雜合子的重要實(shí)驗(yàn)室診斷指標(biāo)。HbE病時(shí)也在HbA2區(qū)帶位置處增加，但含量很大（在10%以上）。HbA2輕度增加亦可見(jiàn)于肝病、腫瘤和某些血液病。

2）抗堿血紅蛋白測(cè)定

原理：又稱堿變性試驗(yàn)。胎兒血紅蛋白（HbF）具有抗堿和抗酸作用。其抗堿作用比HbA更強(qiáng)。將待檢的溶血液與一定量的NaOH溶液混合，作用1min后加入半飽和硫酸銨中止堿變性反應(yīng)。HbF抗堿變性作用強(qiáng)，沒(méi)有變性的存在于上清液中，HbA變性沉淀，取上清液于540nm處測(cè)定吸光度，檢測(cè)出HbF的濃度。此試驗(yàn)也稱為堿變性試驗(yàn)，其檢測(cè)的是抗堿血紅蛋白，除HbF外，HbBarts和部分HbH也具有抗堿能力，需通過(guò)電泳鑒別。

參考值：新生兒＜40%，2歲以后至成人＜2.5%。

臨床意義：珠蛋白生成障礙性貧血HbF增加，持續(xù)性胎兒血紅蛋白癥HbF高至100%。某些疾病時(shí)HbF相對(duì)增加，包括惡性疾病如放射療法后骨髓纖維化、惡性腫瘤骨髓轉(zhuǎn)移、急性或慢性白血病、漿細(xì)胞瘤；非惡性疾病有再生障礙性貧血、純紅細(xì)胞再障、PNH、未治療惡性貧血、卟啉病等。

3）異丙醇沉淀試驗(yàn)

原理：不穩(wěn)定血紅蛋白較正常血紅蛋白更容易裂解，在異丙醇這種能降低血紅蛋白分子內(nèi)部的氫鍵的非極性溶劑中，不穩(wěn)定血紅蛋白更快地沉淀。通過(guò)觀察血紅蛋白液在異丙醇中的沉淀現(xiàn)象對(duì)不穩(wěn)定血紅蛋白進(jìn)行篩檢。

結(jié)果：正常人血紅蛋白液為陰性（30min內(nèi)不沉淀）。

臨床意義：不穩(wěn)定血紅蛋白（包括HbH）于5min時(shí)出現(xiàn)沉淀，20min內(nèi)沉淀逐漸增加，甚至成絮狀或粗顆粒狀。血液中含有較多HbF、HbH、HbE時(shí)也可出現(xiàn)陽(yáng)性結(jié)果。

4）紅細(xì)胞包涵體試驗(yàn)

原理：將煌焦油藍(lán)液與新鮮血液一起孵育，不穩(wěn)定血紅蛋白易變性沉淀形成包涵體。

結(jié)果：陰性。

臨床意義：不穩(wěn)定血紅蛋白病、HbH病呈陽(yáng)性。

5）HbA2測(cè)定

原理：同血紅蛋白電泳。

參考值：1.2%～3.5%。

臨床意義：同血紅蛋白電泳。

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