流式細胞術(shù)原理是什么?
流式細胞術(shù)是一種能夠?qū)蝹€細胞或顆粒進行快速定量分析的技術(shù),它通過檢測熒光信號來獲取關(guān)于細胞的各種信息。其基本原理是將待測樣本中的細胞或微粒在流動液體中形成單一的細流,使每個細胞都能單獨地、一個接一個地通過激光束。當細胞經(jīng)過激光照射區(qū)時,會產(chǎn)生散射光和熒光。
散射光包括前向散射光(FSC)和側(cè)向散射光(SSC)。前向散射光主要反映細胞的大小信息;側(cè)向散射光則與細胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)復雜度相關(guān)。而熒光信號是通過標記特定抗體或染料來實現(xiàn)的,這些標記物能夠特異性地結(jié)合到目標分子上,在受到激光激發(fā)后發(fā)射出不同波長的熒光。檢測器可以區(qū)分不同的熒光顏色,并記錄下來。
通過對散射光和熒光信號的數(shù)據(jù)分析,流式細胞術(shù)不僅可以測定細胞表面及內(nèi)部特定抗原的存在與否、數(shù)量多少等信息,還能對細胞周期、凋亡狀態(tài)以及DNA含量等多種生物學特性進行研究。這項技術(shù)在臨床免疫學中應(yīng)用廣泛,如白血病分型、淋巴瘤診斷、HIV感染監(jiān)測等方面都發(fā)揮著重要作用。
散射光包括前向散射光(FSC)和側(cè)向散射光(SSC)。前向散射光主要反映細胞的大小信息;側(cè)向散射光則與細胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)復雜度相關(guān)。而熒光信號是通過標記特定抗體或染料來實現(xiàn)的,這些標記物能夠特異性地結(jié)合到目標分子上,在受到激光激發(fā)后發(fā)射出不同波長的熒光。檢測器可以區(qū)分不同的熒光顏色,并記錄下來。
通過對散射光和熒光信號的數(shù)據(jù)分析,流式細胞術(shù)不僅可以測定細胞表面及內(nèi)部特定抗原的存在與否、數(shù)量多少等信息,還能對細胞周期、凋亡狀態(tài)以及DNA含量等多種生物學特性進行研究。這項技術(shù)在臨床免疫學中應(yīng)用廣泛,如白血病分型、淋巴瘤診斷、HIV感染監(jiān)測等方面都發(fā)揮著重要作用。
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