生物素在免疫標記技術中扮演著重要角色，主要通過其與親和素或鏈霉親和素之間極高的結合特異性來實現(xiàn)。這種高親和力使得生物素-親和素系統(tǒng)成為一種非常有效的工具，在多種免疫檢測方法中得到廣泛應用。
1. 生物素化抗體：首先將生物素共價連接到特定的單克隆或多克隆抗體上，形成生物素化的探針。這個過程可以通過化學反應實現(xiàn)，如使用NHS酯或光敏生物素等活化形式的生物素與抗體上的氨基或其他功能基團結合。
2. 結合目標抗原：將上述制備好的生物素化抗體加入到含有待測樣本（例如血清、組織切片）中，讓其與目標抗原發(fā)生特異性免疫反應形成復合物。
3. 親和素/鏈霉親和素標記的酶或熒光染料：向體系中添加預先制備好的親和素或鏈霉親和素-酶（如辣根過氧化物酶、堿性磷酸酶）或者熒光素偶聯(lián)物。由于生物素與親和素之間存在極高的親和力，因此可以迅速而穩(wěn)定地形成“抗原-抗體-生物素-親和素/鏈霉親和素-標記物”復合體。
4. 顯色或發(fā)光檢測：最后通過添加底物溶液（對于酶標系統(tǒng)）或者使用熒光顯微鏡觀察（對于熒光標記系統(tǒng)），根據產生的顏色變化或熒光信號強度來判斷目標抗原的存在與否及其含量水平。

該技術不僅提高了檢測的靈敏度和特異性，還簡化了操作步驟，減少了背景干擾，在臨床診斷、科學研究等領域具有廣泛的應用前景。