細菌染色后如何鏡檢?
在進行細菌染色后的鏡檢時,首先需要確保染色過程正確完成。常見的染色方法有革蘭氏染色、抗酸染色等。以最常用的革蘭氏染色為例,其鏡檢步驟如下:
1. 將制備好的涂片放置于顯微鏡載物臺上,并用蓋玻片覆蓋(如果需要)。
2. 先使用低倍鏡(通常是10x或20x物鏡)觀察整個視野,尋找細菌分布較為均勻的區(qū)域。此步是為了大致了解樣本情況,并選擇一個適合高倍放大的區(qū)域。
3. 調(diào)整焦點至清晰可見細胞形態(tài)后,切換到油浸鏡頭(通常為100x)。使用前需在載玻片上滴加一滴香柏油或其他專用油液,然后慢慢將物鏡降至幾乎接觸油面的位置。
4. 在高倍率下仔細觀察細菌的形狀、排列方式及染色特性。對于革蘭氏陽性菌來說,它們會被結(jié)晶紫-碘復(fù)合物牢牢地固定在細胞壁上,在乙醇脫色過程中不會失去顏色,因此呈現(xiàn)紫色;而革蘭氏陰性菌由于其外膜結(jié)構(gòu)較疏松,容易被酒精溶解掉初染劑,故經(jīng)復(fù)染后顯示為紅色。
5. 記錄觀察結(jié)果,并根據(jù)需要繪制或拍攝圖片。
在整個鏡檢過程中要保持耐心和細心,確保每一步操作都準確無誤。同時也要注意保護好顯微鏡設(shè)備,避免因不當使用造成損壞。
1. 將制備好的涂片放置于顯微鏡載物臺上,并用蓋玻片覆蓋(如果需要)。
2. 先使用低倍鏡(通常是10x或20x物鏡)觀察整個視野,尋找細菌分布較為均勻的區(qū)域。此步是為了大致了解樣本情況,并選擇一個適合高倍放大的區(qū)域。
3. 調(diào)整焦點至清晰可見細胞形態(tài)后,切換到油浸鏡頭(通常為100x)。使用前需在載玻片上滴加一滴香柏油或其他專用油液,然后慢慢將物鏡降至幾乎接觸油面的位置。
4. 在高倍率下仔細觀察細菌的形狀、排列方式及染色特性。對于革蘭氏陽性菌來說,它們會被結(jié)晶紫-碘復(fù)合物牢牢地固定在細胞壁上,在乙醇脫色過程中不會失去顏色,因此呈現(xiàn)紫色;而革蘭氏陰性菌由于其外膜結(jié)構(gòu)較疏松,容易被酒精溶解掉初染劑,故經(jīng)復(fù)染后顯示為紅色。
5. 記錄觀察結(jié)果,并根據(jù)需要繪制或拍攝圖片。
在整個鏡檢過程中要保持耐心和細心,確保每一步操作都準確無誤。同時也要注意保護好顯微鏡設(shè)備,避免因不當使用造成損壞。
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