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血清酶催化活性測定常用方法有哪些?

2025-06-12 15:15 來源:正保醫(yī)學教育網(wǎng)
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血清酶催化活性測定是臨床上常用的檢測手段之一,主要用于評估各種疾病狀態(tài)下體內(nèi)特定酶的活性變化。根據(jù)不同的酶和臨床需求,有多種測定方法被廣泛應用,主要包括:
1. 分光光度法 這是最常見的酶活性測定方法,通過測量底物消耗或產(chǎn)物生成導致吸光度的變化來計算酶活性。例如,測定ALT(谷丙轉氨酶)時,可以監(jiān)測340nm波長下NADH的減少量。
2. 熒光法 該方法利用特定熒光物質與反應產(chǎn)物結合后產(chǎn)生熒光強度變化的特點來進行定量分析。這種方法靈敏度高、特異性好,適用于微量樣品檢測。
3. 化學發(fā)光法 利用化學反應產(chǎn)生的光信號來測定酶活性,具有高靈敏性和寬線性范圍等優(yōu)點,在某些特定酶如堿性磷酸酶(ALP)的測定中應用較為廣泛。
4. 電泳技術 結合其他檢測手段,通過分離不同分子量大小的蛋白質或其復合物來進行定性和定量分析。例如在測定肌酸激酶同工酶時會用到此方法。
5. 酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA) 雖然主要用于抗原抗體反應,但也可以用來間接檢測與特定抗體結合后的酶活性變化情況。
6. 放射性同位素法 在底物中加入放射性標記物,通過測定產(chǎn)物中的放射強度來反映酶的催化效率。這種方法靈敏度極高,但由于存在安全問題,在實際操作時需嚴格遵守相關規(guī)范。

以上就是血清酶催化活性測定的一些常用方法,每種方法都有其適用范圍和特點,在選擇具體檢測手段時需要根據(jù)實際情況綜合考慮。

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