蛋白A/G在抗血清純化中起何作用?
蛋白A和蛋白G都是從細(xì)菌中提取的蛋白質(zhì),它們可以特異性地結(jié)合哺乳動(dòng)物免疫球蛋白(Ig)的Fc段。在抗血清純化過(guò)程中,蛋白A/G的主要作用是作為親和層析介質(zhì)的核心成分,用于選擇性地捕獲目標(biāo)抗體。
具體來(lái)說(shuō),在制備特定抗原的單克隆或 polyclonal 抗體時(shí),可以通過(guò)將抗血清流過(guò)含有固定化蛋白A或G的柱子來(lái)實(shí)現(xiàn)。由于這些蛋白質(zhì)能夠與大多數(shù)哺乳動(dòng)物IgG分子的Fc部分緊密結(jié)合,因此可以有效地從復(fù)雜的混合物中分離出目標(biāo)抗體。此外,通過(guò)改變pH值或者添加競(jìng)爭(zhēng)性配體等方式,可以使結(jié)合在柱上的抗體重新釋放出來(lái),從而完成抗體的純化過(guò)程。
總之,在抗血清純化過(guò)程中使用蛋白A/G可以大大提高目標(biāo)抗體的回收率和純度,是生物醫(yī)學(xué)研究中常用的技術(shù)手段之一。
具體來(lái)說(shuō),在制備特定抗原的單克隆或 polyclonal 抗體時(shí),可以通過(guò)將抗血清流過(guò)含有固定化蛋白A或G的柱子來(lái)實(shí)現(xiàn)。由于這些蛋白質(zhì)能夠與大多數(shù)哺乳動(dòng)物IgG分子的Fc部分緊密結(jié)合,因此可以有效地從復(fù)雜的混合物中分離出目標(biāo)抗體。此外,通過(guò)改變pH值或者添加競(jìng)爭(zhēng)性配體等方式,可以使結(jié)合在柱上的抗體重新釋放出來(lái),從而完成抗體的純化過(guò)程。
總之,在抗血清純化過(guò)程中使用蛋白A/G可以大大提高目標(biāo)抗體的回收率和純度,是生物醫(yī)學(xué)研究中常用的技術(shù)手段之一。
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