雜交瘤技術(shù)的基本原理是什么?
雜交瘤技術(shù)的基本原理是檢驗職稱考試需要掌握的內(nèi)容,醫(yī)學教育網(wǎng)小編為大家搜集整理如下,希望可以幫助大家復習掌握。
雜交瘤技術(shù)的基本原理是通過融合兩種細胞而同時保持兩者的主要特征。這兩種細胞分別是經(jīng)抗原免疫的小鼠脾細胞和小鼠骨髓瘤細胞。被特異性抗原免疫的小鼠脾細胞(B淋巴細胞)的主要特征是它的抗體分泌功能,但不能在體外連續(xù)培養(yǎng),小鼠骨髓瘤細胞則可在培養(yǎng)條件下無限分裂、增殖,即具有所謂永生性。在選擇培養(yǎng)基的作用下,只有B細胞與骨髓瘤細胞融合的雜交細胞才能具有持續(xù)培養(yǎng)的能力,形成同時具備抗體分泌功能和保持細胞永生性兩種特征的細胞克隆。
一、B細胞雜交瘤技術(shù)
二、T細胞雜交瘤
三、陽性雜交瘤細胞的克隆化培養(yǎng)
雜交瘤細胞形成后的初期很不穩(wěn)定,為確保單克隆抗體的專一性及避免其他陰性細胞對其生長影響,必須將陽性雜交瘤細胞進行單細胞分離培養(yǎng),產(chǎn)生單克隆雜交瘤細胞,經(jīng)2~3次檢測均為陽性的雜交瘤單個細胞,才能進行克隆化培養(yǎng)。
克隆化培養(yǎng)后的陽性雜交瘤細胞應及時凍存,最好保存在-196℃液氮中。
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