補體總活性的測定知識點匯總!
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(一)檢測試劑:
綿羊紅細(xì)胞;
溶血素;
稀釋緩沖液。
(二)補體總活性測定的實驗原理:
補體最主要的活性是溶細(xì)胞作用。
特異性抗體與紅細(xì)胞結(jié)合后可激活補體,導(dǎo)致紅細(xì)胞表面形成跨膜小孔,使胞外水分滲入,引起紅細(xì)胞腫脹而發(fā)生溶血。補體溶血程度與補體的活性相關(guān),但非直線關(guān)系。在一個適當(dāng)?shù)?、穩(wěn)定的反應(yīng)系統(tǒng)中,溶血反應(yīng)對補體的劑量依賴呈一特殊的S形曲線。如以溶血百分率為縱坐標(biāo),相應(yīng)血清量為橫坐標(biāo),可見在輕微溶血和接近完全溶血處,對補體量的變化不敏感。S形曲線在30%~70%之間最陡,幾乎呈直線,補體量的少許變動,也會造成溶血程度的較大改變,即曲線此階段對補體量的變化非常敏感。
因此,實驗常以50%溶血作為終點指標(biāo),它比100%溶血更為敏感,這一方法稱為補體50%溶血實驗即CH50。
(三)方法評價:
CH50試驗是測定經(jīng)典途徑總補體溶血活性,所反映的是補體9種成分的綜合水平。方法簡便、快速,但敏感性較低。
補體的溶血活性除與試驗中反應(yīng)體積成反比外,還與反應(yīng)所用緩沖液的pH、離子強度、鈣鎂濃度、綿羊紅細(xì)胞數(shù)量和反應(yīng)溫度有一定關(guān)系。
緩沖液pH和離子強度增高,補體活性下降,雖可穩(wěn)定溶血系統(tǒng),但過量則反而抑制溶血反應(yīng),故實驗時對反應(yīng)的各個環(huán)節(jié)應(yīng)嚴(yán)加控制,統(tǒng)一步驟。
(四)臨床意義:
CH50法檢測是補體經(jīng)典途徑的溶血活性,所反映的主要是補體9種成分的綜合水平。
如果測定值過低或者完全無活性,首先考慮補體缺陷,可分別檢測C4、C2、C3和C5等成分的含量;嚴(yán)重肝病時血漿蛋白合成能力受損。
營養(yǎng)不良時蛋白合成原料不足,也可以不同程度地引起血清補體水平下降。
在患系統(tǒng)性紅斑狼瘡、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和強直性脊柱炎等自身免疫病時,血清補體水平隨病情發(fā)生變化。
疾病活動期補體活化過度,血清補體水平下降;病情穩(wěn)定后補體水平又反應(yīng)性增高。因此補體檢測??勺鳛樽陨砻庖卟≡\斷或是否有疾病活動的參考指標(biāo)。
細(xì)菌感染特別是革蘭陰性細(xì)菌感染時,常因補體旁路途徑的活化過度引起血清補體水平降低。心肌梗死、甲狀腺炎、大葉性肺炎、糖尿病、妊娠等情況下血清補體水平常升高。
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