瑞氏染色法染色原理是什么?pH值的影響是什么?
瑞氏染色法是檢驗職稱考試會涉及的內(nèi)容,為了幫助檢驗職稱考生了解,助力檢驗職稱考生復(fù)習(xí),醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)為大家整理如下:
【知識點名稱】瑞氏染色法
【進階攻略】瑞氏染色法是《臨床檢驗基礎(chǔ)》入門知識,屬于熟練掌握的內(nèi)容。常在《專業(yè)知識》和《專業(yè)實踐能力》中考查。
【知識點詳情】
瑞氏染色法:
1.瑞氏染料 由酸性染料伊紅(E-)和堿性染料亞甲藍(M+)組成。伊紅通常為鈉鹽,有色部分為陰離子。亞甲藍(又稱美藍)為四甲基硫堇染料,有對醌型和鄰醌型兩種結(jié)構(gòu)。通常為氯鹽,即氯化美藍,有色部分為陽離子。美藍容易氧化為一、二、三甲基硫堇等次級染料(即天青)。將適量伊紅、美藍溶解在甲醇中,即為瑞氏染料。甲醇的作用:一是溶解美藍和伊紅;二是固定細胞形態(tài)。
2.染色原理 既有物理的吸附作用,又有化學(xué)的親和作用。各種細胞成分化學(xué)性質(zhì)不同,對各種染料的親和力也不一樣。如血紅蛋白、嗜酸性顆粒為堿性蛋白質(zhì),與酸性染料伊紅結(jié)合,染粉紅色,稱為嗜酸性物質(zhì);細胞核蛋白、淋巴細胞、嗜堿性粒細胞胞質(zhì)為酸性,與堿性染料美藍或天青結(jié)合,染紫藍色或藍色,稱為嗜堿性物質(zhì);中性顆粒呈等電狀態(tài)與伊紅和美藍均可結(jié)合,染淡紫紅色,稱為嗜中性物質(zhì);原始紅細胞、早幼紅細胞胞質(zhì)、核仁含較多酸性物質(zhì),染成較濃厚的藍色;中幼紅細胞既含酸性物質(zhì),又含堿性物質(zhì),染成紅藍色或灰紅色;完全成熟紅細胞,酸性物質(zhì)徹底消失后,染成粉紅色。
3.pH值的影響:細胞各種成分均屬蛋白質(zhì),由于蛋白質(zhì)系兩性電解質(zhì),所帶電荷隨溶液pH而定,在偏酸性環(huán)境中正電荷增多,易與伊紅結(jié)合,紅細胞和嗜酸性粒細胞染色偏紅,細胞核呈淡藍色或不染色;在偏堿性環(huán)境中負電荷增多,易與美藍結(jié)合,所有細胞呈灰藍色,顆粒呈深暗,嗜酸性顆粒呈暗褐,甚至棕黑色,中性顆粒偏粗,呈紫黑色。稀釋染液必須用緩沖液,沖洗用水應(yīng)近中性,否則可導(dǎo)致細胞染色反應(yīng)呈色異常,形態(tài)難以識別,甚至錯誤。
【知識點隨手練】
一、單項選擇題
1.瑞氏染色法的染色原理
A.物理吸附
B.化學(xué)親和
C.物理吸附和化學(xué)親和
D.化學(xué)反應(yīng)
E.物理性結(jié)合
2.瑞氏染色中起溶解作用的有機溶劑是
A.無水乙醇
B.甲醇
C.氯仿
D.二甲苯
E.乙二醇
3.瑞氏染料是一種復(fù)合染料,其組成是
A.酸性伊紅和堿性美藍
B.堿性品紅和堿性美藍
C.甲基紅和亞甲藍
D.伊紅和糊精
E.堿性伊紅和酸性美藍
【知識點隨手練參考答案及解析】
一、單項選擇題
1.【答案及解析】C。染色原理:既有物理的吸附作用,又有化學(xué)的親和作用。各種細胞成分化學(xué)性質(zhì)不同,對各種染料的親和力也不一樣。
2.【答案及解析】B。甲醇一方面可以解離ME成為M+和E-。另一方面,其強大的脫水作用可將細胞瞬間固定,增強染色效果。
3.【答案及解析】A。瑞氏染料是由酸性伊紅和堿性美藍組成的復(fù)合染料,伊紅為鈉鹽,有色部分為陰離子,美藍為氯鹽,有色部分為陽離子。
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