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凝膠內(nèi)沉淀試驗:雙向擴散試驗

2020-06-15 14:41 來源:醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)
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凝膠內(nèi)沉淀試驗:雙向擴散試驗是檢驗職稱考試會涉及的內(nèi)容,為了幫助大家了解,醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)為大家整理如下:

雙向擴散試驗:在瓊脂內(nèi)抗原和抗體各自向?qū)Ψ綌U散,在最恰當?shù)谋壤幮纬煽乖贵w沉淀線,根據(jù)沉淀線的位置、形狀以及對比關(guān)系,可對抗原或抗體作出定性分析。雙向擴散試驗也分為試管法和平板法。

1、試管法:

在含有抗原的溶液和含有抗體瓊脂中間,加一層普通瓊脂,讓下層抗體和上層抗原向中間自由擴散,在抗原、抗體濃度最適時形成沉淀線。

2、平板法:

是在瓊脂板上相距3~5mm打一對孔,或者梅花孔、雙排孔、三角孔等。在相應(yīng)孔中加入抗原或抗體,待其自由擴散后,抗原、抗體形成可見的沉淀線。根據(jù)沉淀線的位置可作如下分析:

①抗原、抗體是否存在及其相對含量。一般沉淀線靠近抗原孔,提示抗體量大,沉淀線靠近抗體孔,提示抗原量大。

②抗原、抗體相對分子量的分析;抗原或抗體在瓊脂內(nèi)自由擴散,其速度受分子量影響。醫(yī)學(xué)|教育網(wǎng)編輯整理分子量小者,擴散快,反之較慢。由于慢者擴散圈小,局部濃度較大,形成沉淀線彎向分子量大的一方。如若兩者分子量相等,則形成直線。

③抗原性質(zhì)的分析,受檢的抗原性質(zhì)可能完全相同、部分相同、完全不同,沉淀弧可分別出現(xiàn)完全融合、部分融合、不融合三種情況;

④抗體效價的滴定。抗體效價是抗原、抗體經(jīng)過自由擴散形成沉淀線,出現(xiàn)沉淀線的最高抗體稀釋度為該抗體的效價。

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