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酶活性與酶質(zhì)量測定方法-臨床檢驗主管技師考試

2018-01-09 14:21 來源:
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酶活性與酶質(zhì)量測定方法是臨床檢驗主管技師考試《臨床化學(xué)》大綱中要考生求熟練掌握的考點。醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)小編整理了相關(guān)內(nèi)容,希望對大家的復(fù)習(xí)有幫助。

酶活性測定方法

1.按反應(yīng)時間分類法:這種方法是以酶催化反應(yīng)的平均速度來計算酶的活性,現(xiàn)多已不用。50年代中期開始采用連續(xù)監(jiān)測法。這種方法用自動生化分析儀上完成,可以測酶反應(yīng)的初速度,其結(jié)果遠比固定時間法準(zhǔn)確,在高濃度標(biāo)本尤為明顯,但本法也受到反應(yīng)時間,反應(yīng)溫度,試劑等的影響,應(yīng)加以注意。

定時法:通過測定酶反應(yīng)開始后某一時間段內(nèi)(t1到t2)產(chǎn)物或底物濃度的總變化量來求取酶反應(yīng)初速度的方法,稱為兩點法,其中t1往往取反應(yīng)開始的時間。在酶反應(yīng)一定時間后,往往通過加入強酸、強堿、蛋白沉淀劑等,使反應(yīng)完全停止,所以也叫中止反應(yīng)法。

連續(xù)監(jiān)測法:又稱為動力學(xué)法或速率法、連續(xù)反應(yīng)法。在酶反應(yīng)過程中,用儀器監(jiān)測某一反應(yīng)產(chǎn)物或底物濃度隨時間的變化所發(fā)生的改變,通過計算求出酶反應(yīng)初速度。

平衡法:通過測定酶反應(yīng)開始至反應(yīng)達到平衡時產(chǎn)物或底物濃度總變化量來求出酶活力的方法,又叫終點法。

2.按監(jiān)測方法分類法:可分為①分光光度法;②旋光法;③熒光法;④電化學(xué)方法;⑤化學(xué)反應(yīng)法;⑥核素測定法;⑦量熱法。

酶質(zhì)量測定法

隨著免疫技術(shù)的發(fā)展,出現(xiàn)了利用酶的抗原性,通過抗原、抗體反應(yīng)來直接測定酶的質(zhì)量,直接用質(zhì)量單位ng/ml、μg/L來表示酶含量的高低。免疫學(xué)方法與測定活性方法相比,其優(yōu)點是靈敏度和特異性高,不受體液中其他物質(zhì)的影響,特別是抑制劑和激活劑的影響,當(dāng)血液中有酶抑制劑存在,或因基因缺陷,合成了無活性的酶蛋白時,可以測出滅活的酶蛋白量,有利于疾病診斷和科學(xué)研究。如肌酸激酶同酶MB(CKMB)質(zhì)量測定較活性測定對疾病的診斷價值高。

以上就是醫(yī)學(xué)網(wǎng)小編為大家整理的有關(guān)酶活性與酶質(zhì)量測定方法相關(guān)內(nèi)容,如果您想查看更多的臨床檢驗主管技師考試動態(tài)及資訊請登陸醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)。

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