直接測定FT4 　

　　因為游離甲狀腺激素在周圍組織，直接測定FT4 可免于TT4 水平解釋錯誤。TT4 水平受結(jié)合蛋白影響，因此血清FT4 水平能較TT4 更為準(zhǔn)確診斷甲狀腺功能情況。直接測定FT4 最準(zhǔn)確的是平衡透析法，該方法耗時，費用高，技術(shù)要求也高，大多數(shù)商用實驗室不能提供。這一方法使結(jié)合與游離激素分開。測定血清FT4 的金標(biāo)準(zhǔn)是含有125I-T4 血清夜間平衡透析法。FT4 的百分率計算公式是：FT4 （%）＝透析液中總計數(shù)/血清總125I-T4 計數(shù)X總T4 濃度。在藥箱上有最簡單的轉(zhuǎn)換公式；FT4 在透析液里經(jīng)免疫試驗測定。

　　間接估計FT4 　

　　這些測定容易提供且比較簡單，和前述直接測定FT4 相比，結(jié)果甚為相符。指數(shù)法需要兩個獨立試驗，一個是測定TT4 ，另一個是測定甲狀腺激素的結(jié)合比或T3 樹脂吸附情況。然后，F(xiàn)T4 指數(shù)用TT4 和TBG水平，甲狀腺激素結(jié)合比或T3 樹脂吸附計算。然后用TT4 和TBG水平，甲狀腺激素結(jié)合比或T3 樹脂吸附計算游離T4 指數(shù)。指數(shù)直接與FT4 成比例。免疫試驗法與平衡透析法直接測定FT4 作比較進(jìn)行了標(biāo)準(zhǔn)化，因此報告結(jié)果是絕對單位（ng/dl或pmol/l）。兩個最常用方法是T4 類似物作二步和一步免疫試驗。這些試驗并非完全不受結(jié)合蛋白或血清中導(dǎo)致TT4 假性增高或降低的那些物質(zhì)的影響。

　　測定血清TT3 和FT3 　

　　因T3 與TBG緊密結(jié)合（雖比T4 少10倍），但不是與轉(zhuǎn)甲狀腺蛋白結(jié)合。TT3 測定和以上測定TT4 同樣方法，也受血清TBG改變和那些作用于TBG結(jié)合的那些藥物的影響。測定血清中FT3 水平與上述直接和間接測定T4 方法相同。